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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 40735ES75 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
產品詳情
產品介紹
鬼筆環肽（Phalloidin）是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）的環狀七肽毒素，以高親和力（Kd= 20 nM）選擇性結合于絲狀肌動蛋白F-actin，而不會與單體肌動蛋白G-actin結合，通常用來標記組織切片，細胞培養物或無細胞體系中的F-actin，從而對F-actin進行定性和定量分析。另外，鬼筆環肽衍生物也以相近的親和力結合于大小纖維，無論是動植物來源的肌肉細胞或非肌肉細胞，按照每一個肌動蛋白亞基約與一個鬼筆環肽分子的計量比結合。非特異性結合幾乎可忽略，染色區域和非染色區域辨識度非常明顯。因此，鬼筆環肽衍生物特別適合替代肌動蛋白（Actin）抗體進行相關研究。另外鬼筆環肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons，未標記肌動蛋白（Actin）的許多生理特性都得以維持，比如，同肌動蛋白結合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能發生反應；鬼筆環肽標記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質；以及甘油抽提的肌纖維標記后仍可收縮等。
鬼筆環肽（Phalloidin）的結合阻止絲狀肌動蛋白（微絲）的解離，穩定微絲結構，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發生的臨界濃度（CC）降至＜1 µg/mL，因此，可用作一種聚合促進劑。此外，鬼筆環肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品為FITC標記的鬼筆環肽，染色反應特異性強，對比性高，具有比Actin抗體更好的染色效果，適合用作F-actin的定性和定量檢測。另外，經本品結合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學特性。且本品的結合沒有物種差異性，適用性廣泛。
我司提供儲存液形式（濃度為20 µM）的FITC標記鬼筆環肽，用戶根據自身需求選擇，建議使用濃度為80~200 nM。
產品特色
| 分子式（Molecular Formula） | C56H60N10O15S2 |
| 分子量（Molecular Weight） | 1177.3 |
| 最大激發/發射波長（Ex/Em） | 495~496/513~516 nm |
| 多肽序列（Sequence） | FITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6) |
| 外觀（Appearance） | 淡黃色至黃色溶液 |
存儲條件
冰袋運輸。-20 ℃避光干燥保存，1年有效。
FAQ
Q：為什么我激發后熒光很快就猝滅了？
A：可能是使用濃度過高造成，可以再適當降低一些試劑濃度；可以在尋找視野時使用低能量的激光，待找到合適視野時使用高能量激光激發觀察。2.鬼筆環肽不能和點擊反應（例：EDU）共染色，否則鬼筆環肽沒熒光信號。
Q：該試劑可以應用于組織切片嗎？
A：石蠟切片或者冰凍切片都不建議，可能效果不好，建議使用抗肌動蛋白的抗體。
Q：每次是添加多少試劑量（工作液）進行熒光顯微鏡檢測？
A：建議添加的量是能夠全浸沒細胞即可，不同的細胞染色情況不同，相應鬼筆環肽使用量也需根據不同情況而定。
Q：幾種不同的鬼筆環肽的區別是什么，如何選擇？
A：是熒光基團的不同，激發出的熒光顏色不同，用于區分共染時其他熒光染料的熒光顏色，對于選擇需要機器滿足激發和發射波長要求。
Q：細胞處理時，須用BSA 封閉嗎？
A：是的，這樣做可以降低背景色。
Q：鬼筆環肽染色存在種屬區分嗎？
A：對于對固定的細胞染色，不區分種屬。
Q：想染植物細胞微絲，鬼筆環肽能不能使用？
A：由于植物含細胞壁，因此在未破壞細胞壁時染色進入細胞內較為困難，因此對于含細胞壁細胞染色可以去除細胞壁制備原生質體進行染色。
Q：染色后多久進行上機觀察檢測，可以放置過夜嗎？
A：不推薦，染色后應盡量在 60min 內完成上機觀察和檢測過程。
Q：關于幾種產品的狀態及含量問題介紹？
A：iFluor 系列的 40737、40762、40736 均為粉末，40734 和 40735 均為液體形式提供。對于 300T
的含量不是指含有 300ul，具體的 300T 是指能檢測 300 次左右。
Q：我用鬼筆環肽染小鼠的巨噬細胞，發現鬼筆環肽沒有進入巨噬細胞中，而是在巨噬細胞的表面，
有什么更好的建議嘛？
A：巨噬細胞染色效果較差一些，建議延長透化時間，例如用丙酮（≤-20℃）脫水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化處理 10-15min。
Q：鬼筆環肽可以染活細胞，以及染色后可以用流式檢測嘛？
A： 不推薦，熒光標記的鬼筆環肽不具有細胞透性，因此沒有被廣泛用于活細胞標記 。
Q：我的細胞過表達G-actin，會不會影響鬼筆環肽的染色效果？
A：不會影響鬼筆環肽的染色效果。因為鬼筆環肽只選擇性結合于絲狀肌動蛋白 F-actin，而不會與
單體肌動蛋白 G-actin 結合。
Q：鬼筆環肽可以雙標染色嗎？
A：可以，例如可以與 DAPI 溶液對細胞核進行復染。
Q：鬼筆環肽可以跟免疫熒光同時做嗎？
A：可以和抗體共染，可以先染抗體，再做鬼筆環肽的染色。
Q：可以用那些溶液來固定細胞，要注意什么？
A：可以用溶于PBS 的 4%多聚jia醛溶液進行細胞固定，固定時避免固定劑中含有甲醇成分，因為甲醇
在固定過程中可能破壞肌動蛋白F-actin。
Q：鬼筆環肽染色后，封片保存在 4 度冰箱一段時間后，再檢測信號可以嗎？
A：不建議這樣操作，因為封片后鬼筆環肽的熒光信號會逐漸減弱。建議現加現測。
