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Ceturegel Basement Membrane Matirx 基質膠
類器官（organoids）是指一種利用干細胞、祖細胞等在體外培養(yǎng)出的3D細胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結構組織類似物。2021年，類器官技術被列為“十四五”國家重點研發(fā)專項[1]，作為疾病模型，相比于傳統(tǒng)2D疾病模型，類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機理等與體內環(huán)境更加接近，在多領域將發(fā)揮重要，諸如細胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領域。基質膠作為類器官和3D培養(yǎng)的重要載體，在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。
圖：類器官培養(yǎng)發(fā)展歷史過程[2]
基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下，基質膠聚合形成具有生物學活性的三維基質，能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化。
翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的CeturegelTM Matrix基質膠不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒），超低內毒素含量，包括基本濃度、高濃度、低生長因子和干細胞和類器官專用不同類型的基質膠。
安全性高：不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒）
濃度多樣性：濃度范圍在8~20 mg/ml之間
批次穩(wěn)定性好：嚴格生產(chǎn)質檢過程保證批次間性能穩(wěn)定
低內毒素：內毒素含量<4 EU/ml
污染物檢測： 經(jīng)檢測無支原體和細菌、真菌殘留
單批產(chǎn)量高：單批產(chǎn)量在L級別以上
兼容性好：可與任何類型的細胞培養(yǎng)基兼容
凝膠制備方法
1）基質膠融化后，用預冷的槍頭混勻基質膠。
2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，然后將培養(yǎng)的細胞與基質膠混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入基質膠制備3D培養(yǎng)使用的凝膠，詳見表1。
3）在37℃放置30min，此時即可加入細胞培養(yǎng)液。
圖：3D細胞及類器官培養(yǎng)過程
表1：3D細胞培養(yǎng)基質膠使用參考：
| 培養(yǎng)板（皿）類型 | 細胞培養(yǎng)面積（cm2） | 推薦量(濃度≥3 mg/mL)* |
| 6孔板 | 9.6 | 200 μL/cm2 |
| 12孔板 | 4.5 | 180 μL/cm2 |
| 24孔板 | 2.0 | 180 μL/cm2 |
| 96孔板 | 0.32 | 160 μL/cm2 |
| 35mm培養(yǎng)皿 | 11.78 | 200 μL/cm2 |
| 100mm培養(yǎng)皿 | 58.95 | 200 μL/cm2 |
注：不同批次基質膠有一定的濃度差異，推薦量僅供參考
1、拿到的基質有色差的變化（淡黃色到深紅色）是什么原因？
對于含酚紅的基質膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使基質膠分散均勻。
2、基質膠的操作要注意哪些事項？
所有操作需在無菌環(huán)境下進行，應使用預冷的器材以保證基質膠正常操作。
3、基質膠的如何分裝凍存使用？
可將凍融后的CeturegelTM Matrix基質膠分裝在多個凍存管，凍存管需預冷，分裝后迅速冷凍并保存，避免多次凍融。
| 產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
| 基本濃度 | CeturegelTM Matrix LDEV-Free基質膠 | 40183ES08/10 | 5/10 mL |
| CeturegelTM Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40184ES08/10 | 5/10 mL | |
| 低生長因子 | CeturegelTM Matrix GFR，LDEV-Free 基質膠 | 40185ES08/10 | 5/10 mL |
| CeturegelTM Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40186ES08/10 | 5/10 mL | |
|
高濃度 | CeturegelTM Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質膠 | 40187ES08/10 | 5/10 mL |
| CeturegelTM Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40188ES08/10 | 5/10 mL | |
| CeturegelTM Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質膠 | 40189ES08/10 | 5/10 mL |
[1] chinazx.org./i.php?id=3398
[2] Corrò C, Novellasdemunt L, Li VSW. A brief history of organoids. Am J Physiol Cell Physiol. 2020 Jul 1;319(1):C151-C165. doi: 10.1152/ajpcell.00120.2020. Epub 2020 May 27
