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上海哈靈生物科技有限公司>技術文章>酵母氫ATP酶活性酶連續反應光譜法定量檢測試劑盒 產品說明書

技術文章

酵母氫ATP酶活性酶連續反應光譜法定量檢測試劑盒 產品說明書

閱讀:1538          發布時間:2016-7-13

主要用途

    我公司酵母氫ATP酶(H-ATPase)活性酶連續反應光譜法定量檢測試劑是一種旨在使用氫ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫連續循環法反應系統,排除其它ATP酶干擾的情況下,受到ATP酶水解產生的ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應, 即采用光譜法測定其氧化后吸光峰值(NADH濃度)的變化,以此進行測算單位酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種酵母細胞H-ATP酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。

 注意事項

1. 本產品為21次操作,包括背景對照測定

2. 操作時,須戴手套

3. 系統操作過程中,背景測定只需1次

4. 建議樣品忌用磷酸緩沖溶液、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、EDTA、EGTA等,可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等  

5. 用戶如果檢測質膜型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細胞膜蛋白(本公司提供可溶性真菌/酵母細胞膜蛋白粗提制備試劑盒30043.1

6. 用戶如果檢測液泡型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細胞液泡蛋白(本公司提供真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒10169.3)

7. 強化液(Reagent B)為固體狀,移取方法為:使用1毫升槍頭,將部分剪去;或使用0.5毫升PCR管的蓋子內圈盛滿;或秤重0.1克

8. 加入樣品啟動反應后3秒內即刻光譜測定

9. 反應測定值由高到低變化;測定可以持續30分鐘

10. 測定值由高到低變化,即0分鐘測定讀數高于10分鐘或30分鐘測定讀數,表明有酶活性

11. 光譜測定后,比色皿須清洗*

12. 建議待測樣本蛋白濃度為50微克/50微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量;注意計算公式的調整(本公司提供 Bradford蛋白質濃度定量試劑盒30030.1)

13. 樣品特異活性是指排除其它,包括鈣(EGTA處理)、鈉鉀(烏本苷;ouabain處理)等ATP酶的干擾后的氫ATP酶活性

14. ATP酶活性單位濃度定義:在28℃溫度下,pH 7.5條件下,每分鐘內能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個活性單位

15. 本公司提供系列ATP酶類分析技術產品

 如:
     細菌氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒
     植物氫ATP酶(H+-ATPase)總活性比色法定量檢測試劑盒
     植物P型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒
     植物V型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒
     植物F型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒

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