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上個世紀70年代，Kristensopn和Olsson報道了HRP可神經末梢攝取，經軸漿逆行運輸至神經元胞體，經組織化學方法可顯示出神經元的輪廓，從而開發出HRP追蹤神經元示蹤技術，即為HRP法。3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)是非常的酶免試驗顯色劑，能溶解于多種有機溶劑和雙蒸水中，為穩定的無色溶液，與適量過氧化脲或雙氧水與緩沖液混勻后，與過氧化物酶作用產生清晰的藍色產物，極易觀察，在辣根過氧化物酶的催化下,TMB會產生藍色沉淀，該沉淀不溶于水和乙醇，顯色后呈藍色，可在顯微鏡下觀察。
Leagene 神經HRP示蹤顯色液(TMB法)是動物經麻醉、注入HRP后，游離或絡合型的HRP與氧化劑反應生成絡合物，該絡合物氧化TMB顯色劑，呈藍色，在顯微鏡下清晰可見，該檢測法較DAB法靈敏。該顯色液僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
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