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貨物所在地:北京北京市
所在地: USA
更新時(shí)間:2025-06-24 21:00:07
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描述:
SYBR® Green I 核酸凝膠染料是在瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中檢測(cè)雙鏈DNA(dsDNA)的zui靈敏的染色法之一。因?yàn)?/span>SYBR®Green I 對(duì)dsDNA更敏感,它特別適用于因存在RNA或ssDNA雜質(zhì)而導(dǎo)致結(jié)果不清楚的情況下的分析。SYBR® Green 染料具有特別低的背景熒光以及嚴(yán)格匹配現(xiàn)有儀器的光源與過(guò)濾裝置的光譜特征,因此它非常適合與激光掃描儀一同使用。SYBR®Green I 能夠:
· ü 在檢測(cè)瓊脂凝膠中的DNA時(shí),其靈敏度比溴化乙錠至少高25倍(見(jiàn)圖A)
· ü 易于使用-凝膠浸泡在稀釋的染料中,無(wú)需脫色即可顯影
· ü 兼容紫外透射儀、凝膠記錄系統(tǒng)和激光掃描儀
· ü 可用于多種反應(yīng),包括DNA分型、PCR分析、DNA損傷分析、復(fù)合樣品分析和實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)
組分與儲(chǔ)存:
SYBR® Green I 核酸凝膠染料以溶于DMSO的10,000倍濃縮液的
形式提供。
在-20℃條件下干燥避光冷凍保存。
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 目錄價(jià)(RMB)
SYBR(R) Green I Nucleic(進(jìn)口分裝) CS7561 100ul 560
SYBR(R) Green I Nucleic(進(jìn)口分裝) CS7562 200ul 1050
SYBR(R) Green I Nucleic(進(jìn)口分裝) CS7563 500ul 2200
電泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I預(yù)染方法
1. 該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳
2. 工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍,即為SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一個(gè)月以上。
3. 制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。
4. 樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10。
5. DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合。
6. 上樣、電泳:按常規(guī)操作。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用PH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液,混勻,制成染色溶液。
3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用藍(lán)盾TM觀測(cè)。藍(lán)光可透過(guò)玻璃,觀測(cè)聚丙烯酰胺凝膠時(shí),可直接將托有凝膠的玻璃平皿放入藍(lán)盾TM內(nèi)觀測(cè)。
SYBR Green I使用注意事項(xiàng)
1. 在"SYBR GreenⅠ預(yù)染色方法"中,電泳時(shí)間不要超過(guò)2小時(shí),否則SYBR GreenⅠ會(huì)從DNA上分離出來(lái),會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶。
2. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過(guò)程中,SYBR Green I 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
3. 如果想對(duì)用 SYBR Green I 染過(guò)的膠進(jìn)行 Southern blots,建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。
4. 在紫外照射透視下,與雙鏈 DNA 接合的 SYBR Green I 呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。
5. SYBR Green 對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。
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