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常用組織切片機切片的方法

閱讀:2562      發(fā)布時間:2013-7-31
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冰凍切片 是免疫組織化學染色中常用的一種切片方法。其突出的優(yōu)點是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細胞表面抗原更應 采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。
冰凍時,組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認為冰晶少而大時,影響較小,冰晶小而多時,對組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴重。因此,應盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認為冰凍開始時,冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33。C, 從-30。C降-43。C之間,成核率急劇增加達1018,然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成。

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