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初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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CTL酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀應(yīng)用新發(fā)表關(guān)于“COVID”研究的文獻(xiàn)

時(shí)間:2021/1/6閱讀:463
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我們的一份關(guān)于COVID的論文已經(jīng)提交-預(yù)印本已經(jīng)可以在線獲取并免費(fèi)分發(fā)(下面的“ biorxiv”鏈接):
亞歷山大·雷曼(Alexander Lehmann),格雷格(Greg A)解卷積T細(xì)胞對(duì)SARS-CoV-2的反應(yīng):特異性與偶然交叉和同源交叉反應(yīng)。 2020年。提交給免疫學(xué)前沿。 bioRxiv:
主要消息是:
通過(guò)使用IFN-g ELISPOT(可檢測(cè)效應(yīng)細(xì)胞),可以區(qū)分SARS-CoV-2感染者與未感染人類(lèi)。根據(jù)文獻(xiàn),其他基于流式細(xì)胞術(shù)的技術(shù),如AID,多聚體,CFSE稀釋在未感染的個(gè)體中提供了假陽(yáng)性結(jié)果,據(jù)稱(chēng)是由于檢測(cè)到與季節(jié)性冠狀病毒交叉反應(yīng)的中央記憶細(xì)胞而引起的普通感冒(或者只是沒(méi)有被足夠敏感,可以在頻率相當(dāng)?shù)蜁r(shí)提供干凈的數(shù)據(jù))

SARS-CoV-2上的幾種蛋白質(zhì)抗原具有免疫原性,需要進(jìn)行監(jiān)測(cè)以檢測(cè)所有感染的個(gè)體(祝您好運(yùn)的多聚體僅觀察一種/幾種肽)。

我們?cè)谶@里表明,T細(xì)胞親和力測(cè)量(肽庫(kù)的串行稀釋?zhuān)?duì)于明確區(qū)分SARS-CoV2感染/未感染也很重要。由于(a)有效的電池利用率,以及(b)高吞吐能力且?guī)缀醪簧婕叭斯ぃ虼丝梢允褂肊LISPOT輕松實(shí)現(xiàn)。

無(wú)關(guān)的大型肽池作為特異性控制:隨著越來(lái)越多的科學(xué)家開(kāi)始理解T細(xì)胞免疫監(jiān)測(cè)不能依賴(lài)于幾種肽(多聚體),越來(lái)越多的人(包括SARS-CoV-2 T細(xì)胞診斷中的大多數(shù))使用巨型肽池。但是,到目前為止,尚未確定這是一種有效的方法–我們?cè)谶@里做到了!Our first paper on COVID has just been submitted – the pre-print is already available online and free for distribution (the “biorxiv” link below):
 
Alexander Lehmann, Greg A Kirchenbaum, Ting Zhang, Pedro A Reche, Paul V Lehmann. Deconvoluting the T cell response to SARS-CoV-2: specificity versus chance- and cognate cross-reactivity. 2020. Submitted to Frontiers in Immunology. bioRxiv:
The main messages are:
 
By using IFN-g ELISPOT (that detects effector memory cells) one can distinguish between SARS-CoV-2 infected vs non-infected humans. Based on the literature, other flowcytometry-based techniques like AID, multimers, CFSE dilution provide false positive results in non-infected individuals allegedly due to detecting central memory cells that cross-react with seasonal coronaviruses causing common cold (or, just by not being sensitive enough to provide clean data when the frequencies are rather low)
 
Several protein antigens on SARS-CoV-2 are immunogenic and need to be monitored to detect all infected individuals (good luck multimers looking at one/few peptide(s) only.)
 
We show here that T cell affinity measurements (serial dilution of peptide pools)are also important for a clear SARS-CoV2 infected/non-infected distinction. Such can be easily done with ELISPOT due to (a) efficient cell utilization, and (b) high throughput capability with little labor involved.
 
Irrelevant mega peptide pools as specificity controls: as more and more scientists start to understand that T cell immune monitoring cannot rely on few peptides (multimers), more and more (including most in SARS-CoV-2 T cell diagnostic) use mega peptide pools. However, it has not been so far established that this is a valid approach – we did it here!

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