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福爾根DNA染色液
點擊次數(shù)：2711 發(fā)布時間：2016-5-12
產(chǎn)品簡介：
脫氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基綠-派洛寧法、吖啶橙熒光法等，其中zui經(jīng)典的是Feulgen法,該法是一種經(jīng)典的酶組織化學法。
NobleRyder Feulgen Stain 原理在于DNA經(jīng)溫和的弱酸(例如鹽酸)水解后，嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開，并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開，在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與 Schiff試劑結(jié)合，形成紫紅色化合物，使細胞內(nèi)含有DNA的部位呈紫紅色。紫紅色的產(chǎn)生是因為反應(yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)有醌基(醌基是一個具有顏色的發(fā)色團，所以凡含有DNA的部位就呈紫紅色。該水解作用不影響核糖-嘌呤結(jié)合鍵，因此RNA用此法處理后則分解，所以該法不適用于證明RNA。
產(chǎn)品組成：
編號 名稱 | D6610 3×50ml | Storage | ||
試劑(A):Schiff Reagent | 50ml | 4℃ 避光 | ||
試劑(B): SO2水 | B1:弱酸溶液 | 50ml | RT | |
B2:亞硫酸鹽溶液 | 50ml | RT | ||
使用說明書 | 1份 | |||
自備材料：
1、蒸餾水、
2、恒溫箱
操作步驟(僅供參考)：
(一)石蠟切片染色：
1、組織固定：Carnoy固定石蠟切片較好，10%福爾馬林亦可，不宜采用Bouin固定液。
2、配制弱酸工作液:按弱酸溶液:蒸餾水=1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸餾水，充分混合，即獲得弱酸工作液。
3、石蠟切片脫蠟至蒸餾水。
4、入弱酸工作液，室溫浸洗一下。
5、切片入預熱至60℃的弱酸工作液，孵育8min。
6、切片入室溫的弱酸工作液中沖洗1min。
7、蒸餾水沖洗。
8、切片入Schiff Reagent，室溫避光染色30~60min。
9、在上述染色過程中，配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亞硫酸鹽溶液:蒸餾水=1:5:94 配制，即取弱酸溶液1份、亞硫酸鹽溶液5份、蒸餾水94份，充分混合，即配即用。
10、用新鮮配制的SO2水工作液洗切片3次，每次90s。
11、蒸餾水中洗凈。經(jīng)系列乙醇脫水。二甲苯透明并封片。