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介紹幾種常用的轉染方法!

閱讀:2086        發布時間:2012-10-18

常用的轉染方法有如下幾種:

(1)磷酸鈣(calcium phosphate),
(2)DEAE-dextran,
(3)脂小體(liposome),
(4)電穿孔(electroporation),
(5)顯微注射(microinjection),
(6)病毒感染(retrovirus infection),
(7)基因qiang(gene-gun)等。
 
前兩項方法是以化學物質創造一個化學反應環境,讓DNA附著到動物細胞之表面,然后DNA被動物細胞所吞噬。以脂小體為媒介的方式,其主要機制雖不全然清楚,
但DNA帶負電之磷酸根會與脂小體表面之正電荷結合,脂小體帶正電荷的部分又會與細胞表面帶負電荷的唾液酸(sialic acid)結合,藉以進行轉染。電穿孔則藉電流方式進行。
 
顯微注射是在顯微鏡的幫助下,直接以微細針管將物質穿刺細胞打入。病毒感染是利用多種不同的病毒特性,將DNA改造成病毒的一部份,另外病毒本身致癌基因或有害人類健康的基因也加以改造,再藉病毒感染方式送入基因。
 
基因qiang是一種粒子qiang法(microprojectile bombardment),欲送入的基因可涂裹在細微的粒子zhidan上,再被推壓如散dan方式射入目標細胞或組織中。除以上所提七種方式外,在植物基因轉殖(transgenic plant)上,另可利用農桿菌媒介(Agrobacterium-mediated)方式,首先把基因接上載體,再把載體導入農桿菌,藉由農桿菌為媒介,把外來基因導入植物細胞。
 
參考資料:
http://www.bjsgyq.com/

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