英文名稱：DyLight 550 Phalloidin

中文名稱：DyLight 550 鬼筆環(huán)肽

DyLight 550 鬼筆環(huán)肽是一種結(jié)合了熒光染料DyLight 550與鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）的復(fù)合物，常用于細(xì)胞生物學(xué)研究中特異性標(biāo)記肌動(dòng)蛋白纖維（F-actin），以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的可視化。其制備過程需經(jīng)過多步化學(xué)修飾與純化，確保熒光標(biāo)記的穩(wěn)定性及鬼筆環(huán)肽的生物活性。

制備步驟詳述

1. 鬼筆環(huán)肽的提取與純化
   鬼筆環(huán)肽是一種從毒蘑菇（如鵝膏菌屬）中分離的環(huán)狀七肽，具有高親和力結(jié)合F-actin的特性。其制備首先需通過溶劑萃取法從蘑菇子實(shí)體中提取粗肽混合物，隨后利用離子交換色譜或反相高效液相色譜（RP-HPLC）進(jìn)行分離純化。此步驟需嚴(yán)格控制pH值與鹽濃度，以避免肽鏈降解，最終獲得高純度鬼筆環(huán)肽單體。

2. DyLight 550染料的活化
   DyLight 550是一種磺化花菁類熒光染料，具有水溶性好、光穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)。其活化需通過化學(xué)修飾引入活性基團(tuán)（如N-羥基琥珀酰亞胺酯，NHS-ester）。具體操作為：將DyLight 550溶解于無水二甲基亞砜（DMSO）中，加入三乙胺（TEA）調(diào)節(jié)pH至堿性，隨后緩慢滴加NHS與二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）的混合溶液，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4-6小時(shí)，生成活性酯中間體。反應(yīng)結(jié)束后通過硅膠柱層析純化，去除未反應(yīng)的小分子雜質(zhì)。

3. 鬼筆環(huán)肽與染料的偶聯(lián)反應(yīng)
   將純化后的鬼筆環(huán)肽溶解于磷酸鹽緩沖液（PBS，pH 7.4），逐滴加入活化后的DyLight 550-NHS酯溶液，在冰浴條件下緩慢攪拌反應(yīng)2小時(shí)。此過程中，染料的活性酯基團(tuán)與鬼筆環(huán)肽側(cè)鏈的賴氨酸殘基氨基發(fā)生共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)體系需保持無氧環(huán)境（通氮?dú)獗Ｗo(hù)），以防止氧化副反應(yīng)。

4. 產(chǎn)物分離與純化
   偶聯(lián)反應(yīng)完成后，通過RP-HPLC分離未反應(yīng)的染料與偶聯(lián)產(chǎn)物。選用C18色譜柱，以乙腈-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，收集目標(biāo)峰對(duì)應(yīng)的洗脫液。隨后利用超濾離心管（截留分子量3 kDa）對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行濃縮與脫鹽處理，最終獲得DyLight 550鬼筆環(huán)肽凍干粉，保存于-20℃避光環(huán)境。

應(yīng)用與注意事項(xiàng)

DyLight 550鬼筆環(huán)肽可通過微注射或細(xì)胞滲透劑（如皂苷）導(dǎo)入活細(xì)胞，或直接用于固定細(xì)胞的F-actin染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為557 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為570 nm，兼容大多數(shù)熒光顯微鏡系統(tǒng)。制備過程中需嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，避免交叉污染，同時(shí)需通過質(zhì)譜分析驗(yàn)證偶聯(lián)產(chǎn)物的分子量，確保標(biāo)記效率與化學(xué)穩(wěn)定性。

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

我們提供涵蓋peg多肽、ATTO、Alexa Fluor（AF染料）、AZDye、DyLight、Texas Red 以及 CF 系列染料。它們波長(zhǎng)跨度大，從可見光波段延伸至近紅外區(qū)域，為實(shí)驗(yàn)提供了豐富的選擇。其標(biāo)記方式多樣靈活，且擁有出色的穩(wěn)定性，在熒光成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫分析等實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色，是科研探索的有力工具助力實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)高效開展。歡迎咨詢yff

我們相關(guān)產(chǎn)品有

DyLight 633 streptavidin，DyLight 633 Phalloidin

DyLight 633 MAL 鬼筆環(huán)肽，DyLight 633 MAL Phalloidin

DyLight 633 MAL WGA，DyLight 633 MAL 小麥胚芽凝集素

DyLight 633 MAL streptavidin，DyLight 633 MAL Phalloidin

DyLight 594 鬼筆環(huán)肽，DyLight 594 Phalloidin

DyLight 594 WGA，DyLight 594 小麥胚芽凝集素

DyLight 594 streptavidin，DyLight 594 Phalloidin

DyLight 594 MAL 鬼筆環(huán)肽，DyLight 594 MAL Phalloidin

DyLight 594 MAL WGA，DyLight 594 MAL 小麥胚芽凝集素

DyLight 594 MAL streptavidin，DyLight 594 MAL 鏈霉親和素

DyLight 550 鬼筆環(huán)肽，DyLight 550 Phalloidin

DyLight 550 WGA，DyLight 550 小麥胚芽凝集素

DyLight 550 streptavidin，DyLight 550 Phalloidin

DyLight 550 MAL 鬼筆環(huán)肽，DyLight 550 MAL Phalloidin

DyLight 550 MAL WGA，DyLight 550 MAL 小麥胚芽凝集素

DyLight 550 MAL streptavidin，DyLight 550 MAL Phalloidin

DyLight 521-LS 鬼筆環(huán)肽，DyLight 521-LS Phalloidin

DyLight 521-LS WGA，DyLight 521-LS 小麥胚芽凝集素

DyLight 521-LS streptavidin，DyLight 521-LS Phalloidin

DyLight 515-LS 鬼筆環(huán)肽，DyLight 515-LS Phalloidin