目的制備西妥昔單抗-β葡萄糖苷偶聯物并鑒定其活性與抗體活性.方法采用4-(N-馬來酰亞胺甲基)環己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亞胺酯鈉鹽(Sulfo-SMCC)將西妥昔單抗,β-葡萄糖苷進行共價交聯.采用非還原型聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),比色法,間接熒光法對偶聯物進行鑒定并檢測β-葡萄糖苷,西妥昔單抗的活性.

    結果在電泳圖上可分別見到β葡萄糖苷,西妥昔單抗,西妥昔單抗-β葡萄糖苷偶聯物的清晰條帶.比色法測定結果顯示,西妥昔單抗-β-葡萄糖苷偶聯物的活性低于β-葡萄糖苷(U/L:672.97±46.19 vs869.50±57.28,t=5.972,P0.05),但仍保持的活性.在熒光顯微鏡下可見到與偶聯物共同作用的人膀胱EJ帶有紅色熒光.結論 Sulfo-SMCC可將西妥昔單抗,β-葡萄糖苷偶聯,且偶聯物仍能保持的活性與抗體活性.

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