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分光光度計的線性校正
2015-8-28 閱讀(932)
分光光度計的線性校正
光度線性是指儀器光度測量系統對于照射到接收器上的光輻射功率與系統的測定值之間符合線性關系的程度。光度線性越好,表示光度準確性越高,也就是表明儀器能按準確的比例反映入射輻射的變化。在分光光度計中測得的光度數據都是一個相對值;它都是相對于100%或0%而言的,而100%和0%是自由設定的。如果一個光度系統的響應在0～100%范圍內是線性的,即可測得準確的光度值。由于分光光度計中探測器、電子線路、顯示器等非線性因素的影響,整個系統的光度線性必須加以校正,才能獲得準確的測定值。檢查光度線性的方法有平方比律法、比爾衰減率法、偏振器法、濾光器或濾光器組合法和旋轉扇形板法等。上述方法中,其測量結果有的與制備技術有關,有的與傳遞基準有關。采用光疊加法可以避免儀器之間的傳遞誤差,也與樣品的制備無關,并可用于整個光度范圍內,它是一種以物理原理為基礎的測定方法。
提高線性校正準確度的措施
如果接收器的特性曲線不是一個光滑而有規則的曲線,在2∶1測量點的間隙中,就可能產生錯誤,特別是在100%～50%這一段,間隔大,測定點小。為了彌補這個缺點,可以采用第二個2∶1的系列,例如以70%為起點,按照上面的方法逐點測出修正系數。當要求系統的線性得到更高精度的修正時,還可以建立第三個2∶1的系列,例如以85%為起點等。
線性校正中,需要把第二、第三等系列的數值補充到*系列中去,如圖4所示。Φn系列是將曲線校正到OB線上的修正系數,要校正到OA直線上,需求出各系列之間的關系。當*系列測試完畢后,曲線L上的1、2、3、A點等已知了。選擇某一系列的zui大值I(Φn)由△OAΦ0和△OCΦn可計算出CΦn,修正量Δ0=I(Φn)-CΦn,其中I(Φn)為實測值,CΦn為插值后計算得到。對應的修正系數為e0=Δ0/I(Φn)。經過推導,可知在各系列修正系數的基礎上,再加上各系列zui大值的修正系數e0,即可將各系列的修正系數補充到*系列中去了。
