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   上海恒遠ELISA試劑盒擁有快速、簡便、準確、靈敏度高等幾大特點。ELISA實驗條件主要由實驗室的操作環(huán)境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成，但試劑盒對實驗室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測方法中相對較低的。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的，人為的誤差相對嚴重一些。今天上海恒遠小編就來分享(技術篇)使用快速簡便的ELISA試劑盒需注意哪些問題及解決辦法：

問：加入稀釋劑是否會將樣本進一步稀釋？
答：因為稀釋劑是加入到所有的孔中，標準和被測樣本都被同樣稀釋，所以樣本的濃度可從標準曲線讀出，而不需作稀釋調整。

問：為什么不將測試范圍延伸到所述的靈敏度？
答：靈敏度是統計中大于零的可測到的zui低值。它是通過本底信號和試驗的可變性計算出來的。靈敏度是將20個零復制物的中值加兩個標準差從標準曲線換算成分析物的濃度。而zui低標準是我們可以放心的、仍可與標準曲線成直線相關的zui低點，因而是可定量的。

問：標準曲線為什么要采用4-pl擬合？
答：R&D在研發(fā)和質控我們絕大多數的quantikine ELISA試劑盒時，采用4-相參數的曲線擬合。一般來說，它比log-log和直線有更好的曲線擬合。如果數據分析不可用4-pl的話，log-log是下一個的選擇。

         
問：試驗步驟中說要用500rpm，我的搖床達不到。這個速度是正確的嗎？
答：500rpm使用的是0.12英寸的震蕩軌道。如果你的震蕩器用更大的震蕩軌道，500rpm的確是過快了。在這種情況下，你應根據R&D Systems的建議重新調整震蕩速度。你可拿一個多余的96孔微孔板，加入洗液，洗液的量與實驗時孔中的溶液量一致；封板后，調整震蕩器的速度，直到液體在孔的上部劇烈旋轉但不濺到封膜上或產生泡沫為止。

問：quantikine ELISA試劑為什么需要做稀釋？
答：① 在絕大多數的樣本中細胞因子的含量非常高，如不經稀釋，讀數將高于標準曲線；②也是zui普遍的原因我們建議做稀釋，是將樣本中的干擾或基質效應稀釋掉。

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