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ELISA實驗疑問?解決方案找恒遠!

閱讀:781          發布時間:2014-8-1

    購買我公司酶聯免疫試劑盒,我們不僅可以為客戶提供免費代檢測服務,還能夠為您提供技術指導,在使用的過程中有任何相關實驗問題都可以來電給我們,我們會*時間為您安排解決。已經是七月底了,昨日下午來自湖南的朱老師訂購我司試劑盒,其中有一些相關使用問題,我公司夏*時間為朱老師安排技術人員解析問題。
2014-07-29 朱老師
    樣品和試劑一定需要混勻嗎? 
2014-07-29 上海恒遠技術部
     稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
    
2014-07-29 朱老師
    酶聯免疫試劑盒平衡在什么溫度?需要什么特別條件嗎?
2014-07-29 上海恒遠技術部
    所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫,大約25℃,一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
    
2014-07-29 朱老師
    上一次實驗的時候,也就是本月中旬,我用蛋白免疫兔子制備抗體,取血清作間接法ELISA檢測抗體,做了三次都沒有顯色。抗原是用純化的蛋白與弗氏佐劑乳化后在兔子背部皮下注射的,在第三針免疫之前耳緣靜脈取血檢測。ELISA反應抗原、抗體、二抗都是稀釋1000倍做的,后來還做了次只稀釋100倍,zui后都沒有顏色(HRP標記的二抗,OPD顯色),這是哪里出了問題?
2014-07-29 上海恒遠技術部
    根據您的問題描述有兩者可能:①抗原很弱;②顯色劑的問題,您試試HRP標記的二抗和底物OPD和H2O2顯色。
    
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