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土壤脲酶檢測試劑盒說明書

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貨號:YJS2224                                                 規格:50管/24樣

土壤脲酶檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

產品簡介:

S-UE能夠水解尿素,產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和*氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。

利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N。

試驗中所需的儀器和試劑:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

產品內容:

試劑一:甲苯10ml×1瓶,4℃保存;(自備)

試劑二:粉劑×1瓶,臨用前加入20ml蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;

試劑三:液體65ml×1瓶,4℃保存;

試劑四A液:液體1ml×1瓶,4℃保存;試劑四B液:液體4ml×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;4℃保存一周

試劑五:液體5ml×1瓶,4℃保存;

操作步驟:  

  • 培養  

試劑名稱

測定管

對照管

風干土樣(g)

0.25

0.25

試劑一(μl

125

125

振蕩混勻,使土樣全部濕潤,室溫放置15min

試劑二(μl

625

 

蒸餾水(μl

 

625

試劑三(μl

1250

1250

混勻,放入37水浴培養24h后,10000g常溫離心10min,取上清液。

  • 將培養結束的上清液稀釋10倍(取0.1ml上清液,加入0.9ml蒸餾水)。

 

 

 

3、測氨量

 

測定管

對照管

稀釋后的上清液(μl

400

400

試劑四(μl

80

80

試劑五(μl

60

60

充分混勻,室溫放置20min

蒸餾水(μl

460

460

混勻,578nm處蒸餾水調零,測A值,ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。

脲酶活力的計算:

標準條件下測定的回歸方程為y=0.0915x+0.0373;x為標準品濃度(μg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產生1μgNH3-N定義為一個酶活力單位。

脲酶活力(U/g 土樣)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V反總÷W÷T=874×(ΔA-0.0373)

10:稀釋倍數;T:反應時間,1d;V反總:反應體系總體積:2ml;W:樣本質量,0.25g。

 

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