產品簡介
詳細介紹
作為流式*的突破,默克密理博旗下Amnis公司推出的FlowSight顯微成像流式細胞儀終于讓流式細胞儀睜開了“眼睛”。它不僅能夠獲得大量細胞的群體分析數據,而且還能夠實時看到細胞圖像,讓每一步的分析結果都可以通過圖像進行確認。因此,它被生物通廣大讀者評為“2011生命科學創新產品”之一。
FlowSight是下一代專家級流式細胞儀
FlowSight是一款體積小巧,但是功能強大的下一代專家級流式細胞儀。該系統革命性地設計提高了信噪比以及熒光檢測的靈敏度。標配12個檢測通道,除了傳統熒光強度信息,還能獲得“每個細胞”的明場、暗場以及10個熒光圖像。FlowSight可以多配置四根激光管(405, 488, 561, 642 nm),并加配785nm激光器于SSC信號檢測,同時還可配置96孔板自動上樣系統(AutoSampler)。
的熒光靈敏度
FlowSight具有低于10MESF的超高檢測靈敏度,特別對于弱信號的檢測,有明顯的優勢。下圖直方圖數據表明FlowSight能清楚分辨出Spherotech 8-peak calibration bead在FITC到Cy7通道上所有不同熒光強度微珠的熒光強度峰值。即使用小于5%的熒光強度激發,FITC和PE通道也具有杰出的熒光強度分辨能力。而紅色(PE-Cy5)和遠紅外(PE-Cy7)通道對熒光峰值的分辨能力更是超過目前特好的流式細胞儀。
白細胞五類分群
FlowSight在混合細胞樣品分群方面具有的表現。右圖中應用CD45和SSC作圖,可以清楚地把人外周血單個核細胞(PBMC)區分成5個細胞群。
的785nm散射光激光激光器可以清晰的將嗜酸性粒細胞和噬中性粒細胞區分開。
八色免疫熒光
FlowSight是將流式細胞儀和12通道圖像檢測結合起來的儀器。多檢測通道的搭配,更多的激光器選擇以及自動熒光補償功能,使復雜的細胞分群變得更加簡單。
細胞周期細化分析
細胞周期分為間期(G1、S和G2)和有絲分裂期(細胞分裂階段,M)。M期又分為前、中、后、末期。細胞周期分析是流式細胞術常見的應用之一。FlowSight只要利用DAPI染料標記核酸,根據DNA的凝集情況就可以利用細胞圖像對細胞周期進行精確分析;同時突破傳統流式的應用限制,進一步將M期分為四期。
細胞壞死和凋亡的區分
傳統的流式細胞儀利用膜滲透性染料識別已經死亡和發生凋亡而失去膜完整性的細胞。但是,很難確定細胞死亡是通過凋亡的途徑還是壞死。而FlowSight通過分析每個細胞核差異,可以解決這個問題如下圖所示PI標記的THP-1細胞,壞死的細胞維持完整的細胞核狀態而凋亡的細胞則出現皺縮和破碎現象。
圖形量化分析應用
核轉移的細胞信號檢測
圖形量化分析功能升級后包含核轉位程度的檢測向導,可以識別任意標記的信號分子在細胞質和細胞核之間的轉位過程。右圖的例子展示了轉錄因子NF-κB(綠色)從細胞質到細胞核(橘紅色)轉位的過程。對照細胞(左列)NF-κB主要定位在細胞質,核轉位數值為陰性。激活的細胞(右列)NF-κB主要定位在細胞核,核轉位數值為陽性。
細胞自噬
細胞發生自噬時,作為標記物的細胞質LC3蛋白經過加工在自噬小體膜上大量聚集。利用IDEAS軟件中的形態學參數——Bright Detail Itensity,能夠定量的衡量LC3-RFP熒光聚集的程度,從而對細胞狀態進行量化分析。如圖所示是饑餓引起的細胞自噬現象。正常細胞的自噬程度較低、LC3-RFP聚集程度低(左圖),當收到外界因素,比如饑餓(右圖)、生理壓力、藥物或者感染等刺激時,自噬程度會顯著提高、自噬小體產生,導致LC3-RFP聚集程度上升(右圖)。
圖形量化分析功能
量化的圖像分析加速您的科學發現
圖像量化分析功能(QI)升級包括光學系統、計算機系統和軟件系統的強化,大大提高了FlowSight圖像獲取和分析能力。同時QI也整合了功能強大而且直觀的圖像處理包,內含超過百種量化分析參數和多種基于圖像分析應用的優化分析向導,應用于核轉位、形變、內吞、細胞凋亡等分析。