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上海源葉生物科技有限公司
主營產品： S30260異硫氰酸胍,30259鹽酸胍,嗜熱菌蛋白酶 |
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感受態細胞的轉化實驗流程
2012-7-7 閱讀(1338)
1. 取 100μl 感受態細胞于冰浴上融化。
2. 加入 1μl 純質粒或連接產物，輕輕吹打混勻，冰浴 30 min。
3. 將菌液放入 42℃水浴中熱激 90 秒，立即放入冰浴中 2 min。
4. 加入 0.9ml SOC，于 37℃恒溫搖床上 200rpm×1hr 溫育。
5. 將菌液 4000rpm/min 離心 3min，留 200μ l 上清將菌體打散，均勻涂布于含適當 抗生素的瓊脂平板表面，平板于 37℃倒置培養過夜。
注：
① 新倒的平板可于 37℃培養箱中預先放置數小時至過夜干燥。
② 當轉化的是 TA 克隆連接產物時可在菌液中加入 8μl 1M IPTG 和 40μl 20mg/ml X -gal 以進行藍白斑篩選。
