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上海一基實業有限公司
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一步法PCR反應液產品說明書

時間:2016/6/20閱讀:3169
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YIJI一步法PCR反應液產品說明書(中文版)

主要用途

YIJI一步法PCR反應液是一種旨在方便、快速地進行各種復雜基因組模板,小片斷DNA,保真度要求高,擴增有難度的DNA擴增的一步反應體系。廣泛運用在SAGE和數字化染色體基因型*分析等前沿技術。產品即到即用,無核酶污染,性能穩定,操作方便迅速,擴增產量高,效果滿意,質量保證。

技術背景

該反應液經過精心研制、成功實驗證明的熱啟動高保真PCR反應體系。靈敏度、特異性、穩定性優勢明顯,無需調整鎂離子濃度,無需擔心擴增質量,無需擔心反應失敗。擴增產量高,質量優異。特別是擴增后續的有效操作,例如質粒克隆、DNA連接、測序等,效果堪稱同類產品*。

產品內容

YIJI反應液(Reagent A)                                     600微升
YIJI補充液(Reagent B)                                       1毫升
產品說明書                                                   1份

保存方式

保存在-20℃冰箱里,有效保證6月

用戶自備

引物:用于擴增反應的引導分子
PCR管:用于樣品操作的容器
PCR儀:用于PCR反應

實驗提示

1.一次反應總量為50微升
2.移取30微升YIJI反應液(Reagent A)到0.5毫升PCR管
3.加入用戶自備的引物A和B(分別總量為350納克)
4.加入待測的DNA模板(100納克)
5.加入YIJI補充液(Reagent B)到總量50微升
6.放進4℃微型臺式離心機離心5秒
7.使用1000微升槍頭加入2滴礦物油(注意:參見注意事項4)
8.放進PCR儀
9.PCR反應程序為:

溫度(℃)    時間    循環
95    2分鐘    1
95
Tm用戶設定溫度(50-62)
72    30秒
1分鐘
30秒    
35
72    5分鐘    1
10.PCR產物置于-20℃冰箱里保存,直到進行任何后續實驗
11.進行瓊脂糖凝膠電泳分析

注意事項

1.本產品為20次操作
2.建議整個操作在4℃下進行
3.建議使用潔凈的PCR管和帶有濾芯的槍頭,以免污染
4.根據用戶PCR儀的性能,決定是否加入礦物油(Mineral Oil)
5.配制完成后,即刻進行擴增反應,以確保反應物的活性
6.根據Tm=4(G+C)+2(A+T)公式確定Tm溫度;建議使用分析軟件。用戶可以測試*Tm溫度。擴增片段3kb以上可以增加Tm時間到2分鐘
7.對于基因組DNA的擴增,其循環延長時間為30秒至3分鐘,即小于500bp-30秒;小于2kb-1分鐘;大于2kb,每增加1kb,增加1分鐘
8.避免反復凍融
9.本公司提供PCR系列產品

質量標準
1.本產品經鑒定性能穩定
2.本產品經鑒定無核酶污染
3.本產品經鑒定反應產量高
訂購信息

單組分訂購信息

編號                    名稱                                            規格        
YJ20008.2            YIJI一步法PCR反應液                        20次
YJ20008.2A            YIJI反應液(Reagent A)                        600微升
YJ20008.2B            YIJI補充液(Reagent B)                        1毫升

其它成分訂購信息

產品編號    名稱    規格
YJ12008.1    10倍PCR*緩沖液    100次
YJ12008.2    一步法PCR反應液    100次
YJ12008.3    超白金TAG DNA聚合酶    200 U
YJ12008.4    三磷酸脫氧核糖核苷酸(dNTPs)混合液    2.5/10mM:毫升
YJ12008.5    一步法平端PCR反應液    100次
YJ12113    一步法熒光定量PCR反應液    100次
YJ20024.2    基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒    60次

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