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技術文章

實驗新手咨詢怎樣確定合適血清的稀釋梯度

閱讀:3930          發布時間:2015-4-20

三月份東南大學張同學在我司購買了小鼠干擾素系列試劑盒。他自我介紹是實驗新手,之前沒有做過ELISA等相關實驗。根據我司試劑盒提供的說明書操作2加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。咨詢怎樣確定合適血清的稀釋梯度?

我司根據張同學沒有做過相關實驗經驗特此給客戶去提供了詳細的技術指導并通過我司銷售給以客戶文字答復。

現在實驗室普遍采用方陣滴定法。即取不同的抗原抗體梯度做交叉實驗,比如橫向包被抗原,豎向就用不同濃度抗體。抗原濃度范圍可以從500ng/孔開始逐步稀釋,抗體的開始稀釋倍數則要參考生產商的使用說明書. 血清用1%BSA稀釋,如果血清效價高,可以稀釋20000倍測定,一般都會做多個梯度,如稀釋1000,2000,4000,8000,16000倍。

恒遠預祝張老師實驗成功!

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