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技術(shù)文章

ELISA實(shí)驗(yàn)加樣步驟不當(dāng)可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果及解決方法

閱讀:2030          發(fā)布時(shí)間:2014-8-18

ELISA實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床跟科研得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)操作不當(dāng)可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。現(xiàn)我公司技術(shù)人員將加樣操作中常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以便給同行帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量:

加樣 可能原因:

1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;

2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));

3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。

解決辦法:

1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。

3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

 

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