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技術文章

ELISA試劑盒之酶標基本步驟是什么?

閱讀:2131          發布時間:2019-12-16

    ELISA試劑盒中的酶標用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

    1.包被用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μgml。
在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml4℃過夜。次日棄去孔內溶液用洗滌緩沖液洗3次每次3分鐘。(簡稱洗滌下同)。

    2.加樣加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔陰性對照孔及陽性對照孔)。

    3.加酶標抗體于各反應孔中加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.51小時洗滌。

    4.加底物液顯色于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml37℃1030分鐘。

    5.終止反應于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6.結果判定可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果,反應孔內顏色越深,陽性程度越強;陰性反應為無色或極淺。

    依據ELISA試劑盒檢測所呈顏色的深淺以“+”、“-”號表示。也可測O·D值在ELX808酶標儀上于450nm(若以ABTS顯色則410nm)處以空白對照孔調零后測各孔O·D值若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍即為陽性。

Cytological, physiological, and transcriptomic analyses of golden leaf

coloration in Ginkgo biloba L

Li et al. Horticulture Research (2018) 5:12

DOI 10.1038/s41438-018-0015-4

作者單位:揚州大學

使用產品:有機氯ELISA試劑盒

 

3. Starvation during pregnancy impairs fetal oogenesis and folliculogenesis in offspring in the mouse

Wang et al. Cell Death and Disease (2018) 9:452

DOI 10.1038/s41419-018-0492-2

作者單位:青島農業大學

使用產品:雌二醇ELISA試劑盒

 

Tissue factor pathway inhibitor gene transfer prevents vascular smooth muscle cell proliferation by interfering with the MCP-3/CCR2 pathway

Laboratory Investigation (2015) 95, 1246–1257

© 2015 USCAP, Inc All rights reserved 0023-6837/15

作者單位:哈爾濱醫科大學

使用產品:溴脫氧核苷尿嘧啶ELISA試劑盒

 

Toxicity of glyphosate in feed for weanling piglets and the mechanism of glyphosate detoxification by the liver nuclear receptor CAR/PXR pathway

Journal of Hazardous Materials,Available online 16 November 2019, 121707

doi.org/10.1016/j.jhazmat.2019.121707

作者單位:東北農業大學

使用產品:SOD, GSH-Px, GST, CAT, GSH and MDA ELISA試劑盒

 

 Enhancing methane production of anaerobic sludge digestion by

microaeration: Enzyme activity stimulation, semi-continuous reactor

validation and microbial community analysis

Bioresource Technology,Volume 289, October 2019, 121643

doi.org/10.1016/j.biortech.2019.121643

作者單位:上海電力大學

使用產品:α葡萄糖苷酶ELISA試劑盒

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