更新時間：2018-09-12 09:52:08瀏覽次數：1068
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【簡單介紹】
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【詳細說明】
丹磺酰氯/605-65-2/DANSYL CHLORIDE/M125-5Gelisa實驗不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。 elisa加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間（包括標準品及所有樣品）控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。elisa配液：將96T30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
名稱：丹磺酰氯
品牌：AMRESCO
Item Description：DANSYL CHLORIDE
Code：M125-5G
級別：蛋白組學級
CAS：605-65-2
Size：5G
Shipping Temperature：Frozen
Hazardous Shipping Charges Apply*：No
Hazard Label for Container*：
UN#*：
UNSPSC #：12352200
Shelf Life from Date of Manufacture**：
Parent Category：Proteomics
Child Category：
Grade：PROTEOMICS GRADE
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elisa測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。elisa孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。利用抗原-抗體反應原理，就是以一抗作為探針，它與目的蛋白作用并連接，再用帶有熒光（或同位素）標記的二抗與一抗作用，zui后顯色，發光位置就有目的蛋白。elisa試劑盒組成及試劑配制：1. 酶聯板：一塊（96孔） 2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,600 pg/ml，將其稀釋為400 pg/ml后，再做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別稀釋成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。3. 樣品稀釋液：1×20ml。4. 檢測稀釋液A：1×10ml。5. 檢測稀釋液B：1×10ml。6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100μl/孔），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 11. 覆膜：5張12. 使用說明書：1份
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