更新時間:2018-09-12 09:52:08瀏覽次數:754
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【簡單介紹】
上海博華生物是一家專業的生物試劑供應商,為您提供phospho-KCNC1(Ser503) 磷酸化離子通道蛋白Kv3.1抗體,詳情咨詢!
【詳細說明】
NEXT GEL 5%//NEXT GEL 5% ACRYLAMIDE SOLN PROTEIN/M254-100ML(2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml 藥品生產企業首先應把握好標準品(對照品)的來源,要使用國家認可的標準品(對照品),并按要求對其進行正確性驗證;第二對工作對標準品(對照品)、開封過的標準品(對照品)、標準品(對照品)貯備液的貯存條件和使用期限進行驗證,并作出明確的文件規定,同時作好各項記錄;第三應按要求做好標準品(對照品)賬目管理、領用登記,并在規定條件下貯存。elisa實驗步驟:1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。抗體的親和力 是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。elisa底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。依照有關規定,中國用于藥品成品檢驗的標準品(對照品)來源有:一是中國藥品生物制品檢定所提供的標準品(對照品);二是其他國家的標準品(對照品);三是省級以上藥品檢驗所標定,并經同級食品藥品監管局批準的標準品(對照品)。
NEXT GEL 5%
NEXT GEL 5% ACRYLAMIDE SOLN PROTEIN
M254-100ML
蛋白組學級
100ML
RT
No
NEUROTOXIN / SUSPECTED CARCINOGEN / HIGHLY TOXIC / IRRITANT/SUSPECTED TERATOGEN
41105319
1 year
Acrylamides
NEXT GEL Products
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而對于多抗來講,一旦確定了免疫原并免疫了動物,其產生的抗體的特異性等是不可控的,因而無法保證一定能獲得成功應用的抗體。elisa細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性??贵w的效價鑒定 不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。elisa酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。不*抗原,即半抗原(hapten)是只具有免疫反應性,而無免疫原性的物質,故又稱不*抗原。
關鍵詞:254-100ML