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研域(上海)化學試劑有限公司

多肽受體蛋白相互作用機制

時間:2016-4-5閱讀:1487

高等植物多肽激素CLAVATA3(CLV3)對于植物莖端分生組織干細胞數目的維持起著極其重要的作用。過去幾十年來,CLAVATA1/CLAVATA2 (CLV1/CLV2) 復合體被認為是CLV3多肽在細胞膜上的*受體。 然而zui近的遺傳學分析篩選到了一個新的受體蛋白激酶成員—CORYNE(CRN),并且發現它在CLV3信號途徑中起著非常重要的作用。在一系列遺傳學分析的基礎上,新的CLV3信號轉導通路假設被提出:即CLV1同源二聚體與CLV2/CRN異源復合體可能平行獨立地介導CLV3信號。 然而,新的假設僅僅停留在遺傳學上的預測,仍然缺乏進一步的生物化學和細胞學的證據。為了更好地理解這三個可能的受體蛋白之間的相互關系,林金星研究組利用新型的活體下檢測蛋白質相互作用的技術—螢火蟲熒光素酶互補技術(Firefly luciferase complementation imaging assay, LCI) 在擬南芥葉肉原生質體 (Arabidopsis mesophyll protoplasts) 和煙草葉片 (Nicotiana benthamiana leaves) 兩個體系中分析了CLV1, CLV2和CRN三個受體蛋白之間的相互作用。 實驗結果表明:LCI技術和免疫共沉淀技術 (Co-immunoprecipitation assay) 都證實了CLV2在沒有CLV3多肽刺激的情況下可以直接地與CRN發生相互作用;外源的CLV3多肽處理,并不會明顯地影響CLV2-CRN之間的互作強度;進一步的LCI實驗發現CLV1不能夠與CLV2發生直接的相互作用,但能夠與CRN有微弱的相互作用;除此之外,實驗人員還發現 CRN自身可以形成同源二聚體,而CLV1或CLV2自身不能形成同源二聚體。這些生化和細胞學結果對于新提出的CLV3平行雙通路假設提供了直接的證據。

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