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研域(上海)化學試劑有限公司

NSE Elisa試劑盒產品說明書

時間:2011-9-2閱讀:1815

NSE   Elisa試劑盒產品說明書

試劑盒組成(貯存于2-8C):
酶標板(Coated Wells) 812 酶聯物(Conjugate Reagent) 12ml
樣品稀釋液(Sample Diluent) 12ml 標準品(Standards) 1 set
終止液(Stop Solution) 12ml TMB顯色液(TMB Solution) 12ml
濃縮洗滌液(20x) 30ml

準備工作:
濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至600ml)。未用完的放回2-8C。
每瓶標準品用1ml雙蒸水重建,靜置20分鐘后輕輕混勻。重建的標準品請貯藏于2-8C。

操作步驟:
試劑盒應平衡至室溫再試驗。 取出所需反應板。
分別加入25ul標準品(Standards)、25ul血清于反應板孔中。
每孔加入100ul 樣品稀釋液。輕輕混勻30秒。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內液體,用洗滌液(1x)洗滌反應板,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);這樣反復洗滌5次。
每孔加入100ul酶聯物(Reagent),輕輕混勻10秒。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內液體,用洗滌液(1x)洗滌反應板,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);反復洗滌5次。
每孔加入100ulTMB顯色液,輕輕混勻10秒鐘,置室溫溫育20分鐘。
每孔加入100ul終止液(Stop Solution)。輕輕混勻30秒;確定蘭色變為(重要!)。30分鐘內在450nm處讀OD值。

以OD值為縱坐標,以標準品濃度為橫坐標,繪制標準曲線。根據血清樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度。

示例:
NSE Values (ng/ml) Absorbance (450nm)
0 0.010
5 0.195
15 0.418
40 0.928
100 1.980
200 3.309


預期值:健康人NSE的水平小于15ng/ml。本試劑盒的靈敏度:1ng/ml。
 

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