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人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit實(shí)驗(yàn)原理

時(shí)間:2010-9-11閱讀:1783
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人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit實(shí)驗(yàn)原理

 

 

1 采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit水平。

2. 首先用純化的人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。

3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit再與HRP標(biāo)記的肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。

4. 顏色的深淺和樣品中的肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit呈正相關(guān)。

5.  zui后用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit濃度

目的:測(cè)定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit的含量。

 

5. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

6. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清,如有沉淀,再次離心。

安全性:
1
 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2
 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3
 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4   Elisa試劑盒請(qǐng)遠(yuǎn)離兒童

自備物品:

1 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個(gè)月

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