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蛋白質提取試劑高效RIPA組織/細胞快速裂解液
貨號 ：R0010
規格 ：20ml/100ml
本產品配有一支 PMSF（0.3ml/1.5ml）
保存 ：RIPA 裂解液 4℃保存，PMSF-20 ℃保存。
使用說明：
如發現 RIPA 有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量， 取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。 混勻備用 （PMSF 現用現加）。
1、樣品前處理：
a)對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。
c)對于組織樣品： 把組織剪切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液， 如果需要高濃度的蛋白樣品， 可以適當減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿，直充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘， 取上清， 即可進行后續的蛋白濃度測定、 SDS-PAGE、 Western blotting 和免疫沉淀等操作。
注意事項 ：
本試劑為強烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同時，也會將基因組一并釋放出來，若細胞量多會造成細胞裂解液粘稠：此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液，煮沸再離心，離心后直接上樣電泳；若想測定濃度，可入加少量 SDS（1%） ，煮沸后離心測濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑，所以不適合使用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒，請選擇 BCA 法或者 Lowry 法檢測蛋白濃度。
如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散粘稠狀物，隨后離心取上清用于后續實驗。
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蛋白質提取試劑高效RIPA組織/細胞快速裂解液訂購說明：
1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。
2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
蛋白質提取試劑高效RIPA組織/細胞快速裂解液運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。
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