酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細胞的溶酶體內，所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內質網和胞質內。各種動物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5～5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯法)以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯生成有色產物，定位于細胞質中。對某些酸性磷酸酶來講，Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑，Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細胞涂片、冰凍切片等，亦可用于石蠟切片。