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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>糖代謝系列>> BC4950-50T/24S海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝

海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝

  • 海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC4950-50T/24S
  • 廠商性質 生產商
  • 產品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-04-17 17:09:35瀏覽次數:705評價

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現貨 規格 50T/48S
貨號 BC4945 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合
主要用途 海藻糖合成酶(TS)活性檢測
海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝
有效期
6個月
儲存條件
2-8℃
單位

英文名稱
Trehalose synthase (TS) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/24S

海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。

貨號:BC4950

規格:50T/24S

產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規格

保存條件

提取液

液體30 mL×1

2-8℃保存

試劑一

液體7mL×1

2-8℃保存

試劑二

粉劑×2

2-8℃保存

試劑三

液體30 mL×1

2-8℃保存

試劑四

液體30 mL×1

2-8℃保存

標準品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑二:臨用取一瓶前先加入7 mL蒸餾水,震蕩使其充分溶解(若溶解后的試劑中有黑色顆粒物,可離心后取上清使用),用不完的試劑2-8℃保存2周。

2、 工作液的配制:臨用前將試劑三和試劑四1:1等體積混合,根據樣本實際所需用量現配現用。

3、 標準品:臨用前加入1 mL蒸餾水配制成50 μmol/mL的麥芽糖標準溶液,用不完的試劑2-8℃保存2周。然后用蒸餾水16倍稀釋成3.125 μmol/mL的麥芽糖標準溶液(建議吸取25μL 50μmol/mL麥芽糖標準溶液,加入375μL蒸餾水中,充分混勻)待測,現用現配

產品說明:

藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩定性、抗凍結性等特性,是細胞在不良環境條件下產生的一種重要的抗逆應激物之一,它對生物大分子和生物組織有著非特異性的保護作用。

海藻糖合成酶(Trehalose SynthaseTS)能催化麥芽糖生成海藻糖,是海藻糖生物合成的關鍵途徑之一。本試劑盒使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合成酶的活性。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、低溫離心機、恒溫水浴鍋、可調式移液槍、研缽/勻漿器、蒸餾水。

 

操作步驟:

一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1 mL提取液,超聲波破碎細胞(功率200W,超聲3s,間隔9s,重復30次);然后8000 g4℃,離心10 min,取上清(若上清不夠澄清,建議重復上述離心步驟),置于冰上待檢。

組織:按照組織質量(g: 提取液體積(mL)為1 : 5~10 的比例(建議稱取約0.1 g組織,加入1 mL提取液),進行冰浴勻漿。8000 g4℃,離心10 min,取上清(若上清不夠澄清,建議重復上述離心步驟,置于冰上待檢。

二、測定步驟

1、 分光光度計預熱30 min以上,調節波長至505 nm,蒸餾水調零。

2、 EP管中進行如下操作:

1)酶促反應

加入試劑(μL

對照管

測定管

標準管

空白管

樣本

100

100

-

-

試劑一

-

100

-

-

標準溶液

-

-

100

-

蒸餾水

-

-

100

200

充分混勻,35℃水浴反應2 h,沸水浴5 min終止反應,冷卻至室溫。

-

-

試劑一

100

-

-

-

試劑二

200

200

200

200

混勻,40℃過夜反應(12 h以上),沸水浴5 min終止反應,冷卻至室溫。10000 g 25℃離心10 min,取上清待測。

2)顯色反應(在EP管中進行以下操作)

加入試劑(μL

對照管

測定管

標準管

空白管

上清液

100

100

100

100

工作液

900

900

900

900

充分混勻,37℃反應30 min,于1 mL玻璃比色皿中測定505 nm處的吸光值,分別記為A對照、A測定、A標準與A空白,ΔA測定=A對照-A測定、ΔA標準=A標準-A空白。

注:空白管和標準管只需測1~2次。

三、酶活性計算

1、按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化1 nmol 麥芽糖生成1 nmol 海藻糖定義為一個酶活力單位。

TS活(U/mg prot= C×ΔA測定÷ΔA標準×V÷V×Cpr÷T×F÷2

=13.02×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr×F

2、按樣本質量計算:

單位的定義:每g組織每分鐘催化1 nmol 麥芽糖生成1 nmol 海藻糖定義為一個酶活力單位。

TS活(U/g 質量)= C×ΔA測定÷ΔA標準×V÷V÷V樣總×W÷T×F÷2

=13.02×ΔA測定÷ΔA標準÷W×F

3、按細菌或細胞數量計算:

單位的定義:每104個細菌或細胞每分鐘催化1 nmol 麥芽糖生成1 nmol 海藻糖定義為一個酶活力單位。

TS活(U/104 cell= C×ΔA測定÷ΔA標準×V÷V÷V樣總×cell÷T×F÷2

=13.02×ΔA測定÷ΔA標準÷cell×F

 C標:標準管濃度,3.125 μmol/mL=3.125×103 nmol/mLV樣總:加入提取液體積,1 mLV樣:加入樣本體積,0.1 mLT:反應時間,120 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,gcell:細胞或細菌總數,以萬計;F:稀釋倍數; 21分子麥芽糖可轉化為2分子葡萄糖

注意事項:

1、 當吸光值大于1.5或者ΔA測定大于1時,建議將樣本用蒸餾水稀釋后測量。計算公式注意乘以稀釋倍數。

實驗實例:

1、 0.1 g小鼠肝臟加入1 mL提取液進行勻漿研磨,取上清用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作,用1 mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A對照-A測定=1.471-0.817=0.654ΔA標準=A標準-A空白=0.790-0.003=0.787按樣本質量計算酶活得:

TS活(U/g 質量)= 13.02×ΔA測定÷ΔA標準÷W×F =216.393 U/g 質量。

2、 0.1 g海帶加入1 mL提取液進行勻漿研磨,取上清用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作,用1 mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A對照-A測定=1.059-0.629=0.430ΔA標準=A標準-A空白=0.790-0.003=0.787按樣本質量計算酶活得:

TS活(U/g 質量)=13.02×ΔA測定÷ΔA標準÷W×F =142.277 U/g 質量。

相關系列產品:

BC0330/BC0335 海藻糖含量檢測試劑盒

BC2510/BC2515 海藻糖酶(THL)活性檢測試劑盒


海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝 海藻糖合成酶(TS)活性檢測試劑盒 糖代謝

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