維生素E（VE）含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC1425
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：自備無水乙醇，常溫保存。

2. 試劑二：自備*，常溫保存。

3. 試劑五貯備液的制備：將試劑五的粉劑溶于2 mL無水乙醇配制成貯備液，2-8℃避光保存待用。

4. 試劑五應用液的制備：取試劑五貯備液用無水乙醇20倍稀釋后使用，建議當天配制當天使用。

5. 標準品：臨用前加入1 mL試劑三，配成20 mg/mL的標準品溶液。

產品說明：
維生素E（Vitamin E）是一種天然脂溶性抗氧化劑，能阻斷機體不飽和脂肪酸的過氧化，維持不飽和脂肪酸細胞膜的完整性和正常功能，并可清除超氧陰離子自由基，具有延緩衰老、預防溶血性貧血等作用，在醫藥、化妝品、保健品、食品行業具有較高的應用價值。
VE還原Fe³⁺為Fe²⁺，Fe²⁺與1,10-菲羅啉產生有色絡合物，在510nm有特征吸收峰。
技術指標：
低檢出限：2.9178 μg/mL
線性范圍：3.125-100 μg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、漩渦震蕩儀、無水乙醇、*、蒸餾水和EP管。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：

1. 離心后，在吸取上層*抽提液時，切勿將中間無水乙醇與水的液相層吸入，以免影響試驗結果。

2. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。

3. 若反應體系產生沉淀，建議將待測樣本用試劑三進行適當的稀釋，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

4. 比色皿需用無水乙醇沖洗，勿用蒸餾水以防出現分層影響試驗數據。

5. 顯色結束后盡快完成測定。

實驗實例：

1. 取0.1g核桃依次加入200µL蒸餾水，300µL的試劑一，500µL試劑二進行勻漿研磨，勻漿后在漩渦混勻儀上震蕩5min（充分抽提），于25℃，5000g離心5min，取上層正*抽提液300µL加入到900µL無水乙醇中（上層抽提液：無水乙醇=1:3），之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定管=A測定管-A對照管=0.336-0.046=0.29，根據標準曲線y=0.0042x+0.1849，計算x=25.02，按樣本質量計算維生素E含量得：

VE含量（μg/g質量）=2×x÷W=2×25.02÷0.1=500.4 μg/g質量。
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