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溴代十六烷基*胺(CTAB)的使用方法

閱讀:3791      發布時間:2016-7-12
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溴代十六烷基*胺(CTAB)的使用方法

溴代十六烷基*胺簡稱: CTAB,英文名稱Cetyltrimethylammonium bromide, 又稱鯨蠟烷*基溴化銨,十六烷基*基溴化銨,白色粉末狀,是一種季銨鹽溶于水,在酸性溶液中保持穩定。是一種陽離子去垢劑,用于從大量產生粘多糖的有機體如植物以及某些革蘭氏陰性菌(包括E.coli的某些株)中制備純化DNA 。

CTAB結構式

原理:CTAB是一種陽離子去污劑,具有從低離子強度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在這種條件下,蛋白質和中性多聚糖仍留在溶液里,在高離子強度的溶液里,能夠與蛋白質和大多數酸性多聚糖以外的多聚糖形成復合物,只是不能沉淀核酸,從而將核酸分離出來。

使用方法:

1.提取DNA配方:

CTAB 4g

NaCl 16.364 g

1M Tris-HCl 20 mL( PH8.0)

冷卻后0.2-1%(400ul)氯仿-異戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml異戊醇,搖勻即可。

2.提取RNA配方

2% CTAB(W/V)

2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)

100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配制)

25mM EDTA

由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發生反應,所以配RNA提取緩沖液時直接用DEPC 處理的水

使用注意事項:CTAB有毒,半數致死量(大鼠,靜脈)44mg/kg。具有刺激性,若吸入、攝入或皮膚吸收,會對人體有害。使用時要戴合適的手套和防護眼鏡(或在通風櫥操作),避免吸入其粉塵

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