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電極緩沖液中甘氨酸的作用

閱讀:5257      發布時間:2017-2-3
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甘氨酸同Tris(三羥甲基氨基甲烷)一起組成電泳緩沖液中的緩沖對,可以穩定電泳過程中的PH值。
在SDS-PAGE不連續電泳中,制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統,濃縮膠是pH6.7,分離膠pH8.9;
而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中,其pH環境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低;而CL離子卻很高,兩者之間形成導電性較低的區帶,蛋白分子就介于二者之間泳動。由于導電性與電場強度成反比,這一區帶便形成了較高的電壓梯度,壓著蛋白質分子聚集到一起,濃縮為一狹窄的區帶。當樣品進入分離膠后,由于膠中pH的增加,呈堿性,甘氨酸大量解離,泳動速率增加,直接緊隨氯離子之后,同時由于分離膠孔徑的縮小,在電場的作用下,蛋白分子根據其固有的帶電性和分子大小進行分離。

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