BCA蛋白檢測試劑(二喹啉甲酸)
BCA蛋白定量試劑應用:
蛋白質:蛋白質相互作用研究
測量柱分數親和層析后
膜蛋白的細胞提取物的百分回收率估算
的融合蛋白的高通量篩選
亮點:
色度-估計目視或測量標準的分光光度計或酶標儀(562nm)
優良的均勻性-展品較少的蛋白質,蛋白質的變化比染料結合的方法
兼容-不受大多數離子和非離子型洗滌劑的典型濃度
適度快速-更容易和4倍的速度比傳統的Lowry法
高線性-對BSA的線性工作范圍相當于20?2000μg/mL
敏感-檢測液5μg/ml增強協議。
如何BCA蛋白定量試劑檢測蛋白質:
BCA蛋白測定相結合的公知的還原的Cu2+為Cu1+蛋白在堿性介質中的高靈敏度和選擇性的二喹啉甲酸亞銅陽離子(銅1+)由比色法檢測。*個步驟是在堿性環境中,以形成光的藍色絡合物與蛋白質的螯合銅。含有三個或更多個氨基酸殘基的肽在該反應中,被稱為雙縮脲反應,生成有色絡合物配合物與二價銅離子在堿性環境中,含有酒石酸鈉鉀。
在第二步驟中的彩色顯影反應,二辛可寧酸(BCA)與減少(亞銅)的*個步驟中形成的陽離子反應。激烈的紫色色反應產物的查詢結果從兩個分子的BCA螯合與一個一價銅離子。的BCA/銅配合物是水溶性的,并表現出強的線性增加蛋白質濃度在562nm處的吸光度。的BCA試劑是更敏感(檢測下限)的*反應比淡藍色的顏色的約100倍。
BCA顏色形成的反應,導致由四個位的氨基酸序列的蛋白質的氨基酸殘基(半胱氨酸或胱氨酸,酪氨酸和色氨酸)的強烈影響。然而,不像在考馬斯亮藍染料結合的方法中,普遍的肽骨架也有助于顏色的形成,有助于大限度地減少由蛋白質組成差異引起的變異。
產品詳細說明:
物質 支持的濃度 物質 支持的濃度 NP-40 5.00% 葡萄糖(鮮) 10mM的 EMULG??EN 1.00% EDTA 10mM的 HEPES 100毫 氯化鈉 1.0M DTT 1mM的 氫氧化鈉 0.1M 胍•鹽酸 4.0M 硫酸銨 1.5M 的Triton X-100的 5.00% 醋酸鈉,pH值5.5; 200mM的 辛基-β-葡糖苷 5.00% SDS 5.00% 尿素 3.0 M 的Brij-35 5.00% 蔗糖(鮮) 40% 蘆布若爾 1.00% 甘氨酸,pH 2.8 100毫 CHAPS 5.00%
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北京索萊寶科技有限公司 | 下載次數 |
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74.5KB | 資料類型 |
WORD 文檔 |
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