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ELISA樣品制備和采集方法

時間:2024/5/14閱讀:415
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不同的細胞或組織,具體的ELISA樣品制備和采集方法可能不同,具體的ELISA樣品制備和采集方法如下:

血清:使用血清分離管(SST),讓樣品在室溫下凝結30分鐘,然后在1000 x g下離心15分鐘。立即取出血清并進行測定或等分

試樣,將樣品儲存在≤-20°C的溫度下。

血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內以1000 x g離心15分鐘。立即測定或等分試樣,并

將樣品儲存在≤-20°C的溫度下。

貧血小板血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內以1000 x g離心15分鐘。建議在2-8°C下

對血漿進行額外的10000 x g離心10分鐘,以完quan去除血小板。立即測定或等分試樣,并將樣品儲存在≤-20°C的溫度下。

細胞培養上清液:以500 x g離心5分鐘去除顆粒。立即取出上清液或等分試樣進行分析,并將樣品儲存在≤-20°C的溫度下。

組織勻漿:組織勻漿的制備會因組織類型而異。用1X PBS沖洗組織以去除多余的血液,在20 mL 1X PBS中勻漿,并在≤-20°C下

儲存過夜。在進行兩次凍融循環以破壞細胞膜后,將勻漿以5000xg離心5分鐘。立即取出上清液并進行分析。或者,將樣品等分

,并在≤-20°C的溫度下儲存。

細胞裂解物:將細胞溶解在裂解緩沖液中,并在冰上放置30分鐘。將試管以14000 x g離心5分鐘,以除去不溶性物質。將上清

液等分放入新的試管中,并丟棄剩余的全細胞提取物。使用總蛋白測定法定量總蛋白濃度。立即測定或等分試樣,并在≤-20°C

下儲存。組織溶解物:用PBS沖洗組織,切成1-2毫米的片,并用PBS中的組織勻漿器勻漿。加入等體積的含有蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖

液,在室溫下輕輕攪拌裂解組織30分鐘。用離心機清除碎屑。使用總蛋白測定法定量總蛋白濃度。立即測定或等分試樣,并在

≤-20°C下儲存。

唾液:在試管中收集唾液,并在10000 x g下離心5分鐘。收集水層,立即進行測定或等分試樣,并將樣品儲存在≤-20°C的溫度

下。

尿液:無菌收集當天的第一個尿液(中流),直接排泄到無菌容器中。用離心機去除顆粒物。立即測定或等分試樣,并在≤-20°C

下儲存。



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