當前位置:上海聯碩生物科技有限公司>>優勢品牌>>AMEKO>> RC52314-50ML*2AMEKO試劑:特超敏ECL化學發光底物
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AMEKO試劑:特超敏ECL化學發光底物
AMEKO試劑:特超敏ECL化學發光底物
產品用途:
用于HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交。
產品特點:
1、靈敏度高:可檢測低皮克級的蛋白;
2、信號持續時間長:光信號持續時間長達5小時;
3、穩定試劑:工作液在24小時內保持穩定;
4、成像方法:適用于X/射線/膠片、CCD或激光凝膠成像儀;
5、價格經濟:針對稀釋的抗體濃度條件進行了優化,節省抗體:
一抗:以1 µg/mL儲存液稀釋1:1,000至1:4,000倍
二抗:以1 µg/mL儲存液稀釋1:2,000至1:5,000倍
6、簡單易用:可替代其它公司的ECL發光底物,操作步驟無需進行特別優化;
使用方法:
1、執行常規 SDS-PAGE、轉膜和Western Blot步驟。注意用HRP標記IgG或用一抗-鏈親和素-生物/素-HRP夾法。
2、Western Blot最后一次洗膜的同時配制發光工作液:分別取等體積的A液和B液,放入干凈容器中混合(注意吸取A液和B液的吸頭一定要分開,避免試劑污染)。建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。
3、Western Blot最后一次洗膜后,用鑷子將膜取出,用濾紙吸去多余的洗滌液(切勿接觸膜的蛋白面),然后置于一潔凈保鮮膜上或塑料容器內。
4、根據膜的大小,按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上,確保工作液均勻覆蓋在膜上,放置1-3分鐘。
5、取膜,用濾紙吸去多余的液體,將膜放在兩片保鮮膜中間,隨后進行壓片檢測或化學發光成像儀檢測。
6、壓片檢測:將膜固定于X光膠片暗盒內(注意蛋白面向上)。暗房內壓X光膠片,分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘。顯影沖洗。
7、化學發光成像儀檢測:將膜放置到化學發光成像儀內,參考儀器說明書進行檢測。
注:建議第一次曝光60秒,之后可調整曝光時間以達到優良結果。化學發光反應在底物孵育后的前5-30min期間是烈的。這一反應可以持續幾個小時,但強度會隨時間下降,如有底物孵育后較長時間后曝光,曝光時間可能需要延長以獲得較強信號。
保存條件:室溫運輸,4°℃密封避光保存一年,短期可放置室溫。
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