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ELISA試劑盒操作的5個方面

時間:2021/6/7閱讀:907
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ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應留神以下5個方面:

1. 跟著病況的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發作大幅動搖,因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

2. 加樣一般運用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。

3.在成批手藝檢測中,還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導致過錯效果或定量不準。

4. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實驗勝敗的一個關鍵步驟。目的是除掉未結合的免疫反響物,間斷抗原抗體反響,除掉標本中與反響無關的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。

5. 斷定效果須運用ELISA試劑盒測讀儀,比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。酶標儀具有杰出的重復性。

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