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研域小講堂:該怎樣挑選適宜的HA標簽抗體?

時間:2019/9/20閱讀:2031
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HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛使用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛使用。HA 標簽抗體能特異識別C結尾或N結尾帶有HA標簽(HA-tagged)的交融蛋白,也能夠用于檢測和HA tag交融表達蛋白的表達、細胞內ding位,以及純化、定性或定量檢測HA tag交融表達蛋白等。

挑選適宜HA標簽抗體需求考慮的要素

我們在挑選一個標簽抗體時,首要根據自己實驗使用上的需求。這兒需求考慮的要素包含,HA抗體的使用檢測類型、HA抗體的克隆性及制備來歷等。比方該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測?是否能夠用于Western Bloting和免疫沉淀IP實驗?是否需求HRP偶聯的單克隆HA標簽抗體?還是一個兔來歷的HA多抗更適宜?
      
一般來說,使用類型越多,在使用過程中的挑選地步就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性都要優于多克隆抗體,而多克隆。別的,抗體的效價也是調查該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際使用時的稀釋比率。

一個效價高的100μl HA抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,終究使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的HA抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,終究使用液相當于200ml)性價比更高。

 

因此在挑選抗體的時分,不但需求考慮抗體的量,還需求考慮抗體的效價,即不同使用的主張稀釋比率。

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