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反相c18色譜柱的封端怎么選擇?

閱讀:1821      發(fā)布時間:2023-2-27
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  反相c18色譜柱液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間,并且使方法更具穩(wěn)定性。
 
  反相c18色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇,但由于各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異。即使都是C18柱,不同品牌、同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。
 
  反相c18色譜柱的粒徑,影響色譜分離度。粒徑越小,分離越快,柱效越高,但柱壓力越高,柱容易被污染,導致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料,復雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。
 
  如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍,因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實情況而定。
 
  反相c18色譜柱的封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對于極性樣品而言,未封端處理的色譜柱分離效果較差。
 
  液相色譜柱的活化操作,以常見的C18反相分析柱為例,出廠時一般都封裝有甲醇或乙腈等有機溶劑。隨著時間的推移,色譜柱內(nèi)的有機溶劑緩慢揮發(fā),色譜柱內(nèi)可能出現(xiàn)氣泡。因此,新購買的色譜柱在使用前一般都要進行活化操作。

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