2030046 無血清,無DMSO低溫凍存培養(yǎng)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 北京聯(lián)立信生物技術(shù)有限公司
- 品牌
- 型號 2030046
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2015/9/3 17:25:46
- 訪問次數(shù) 423
產(chǎn)品標(biāo)簽
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CELLVATION™ CRYOPRESERVATION MEDIUM
(CellVation —無血清凍存培養(yǎng)基)
描述:
Mpbio公司的Cellvation™ 是一款非常*的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基,不含有DMSO或血清,專門設(shè)計(jì)用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,已成功用于超過50種細(xì)胞的凍存/復(fù)蘇實(shí)驗(yàn),涵蓋原代細(xì)胞、有限細(xì)胞,懸浮細(xì)胞及貼壁細(xì)胞。除此之外,cellvation™也是所有血清依賴性培養(yǎng)細(xì)胞凍存的理想選擇。
優(yōu)點(diǎn):
* 不需血清,不需DMSO,不需細(xì)胞培養(yǎng)基,只需按1 x 106 - 1 x 107 cells/ml的濃度加入相應(yīng)體積的cellvation即可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的凍存;
*不含血清,適用于無血清生長細(xì)胞的凍存/解凍實(shí)驗(yàn),也適用于血清依賴性細(xì)胞的凍存;
* 不含DMSO,避免出現(xiàn)由DMSO引起的細(xì)胞毒性或形態(tài)分化現(xiàn)象;
**復(fù)蘇率與更快的細(xì)胞貼壁速度;
* 1X濃度培養(yǎng)基,不需稀釋,即用型。
* 一系列記錄顯示已成功用于50多種細(xì)胞的凍存:細(xì)胞系或原代細(xì)胞。
應(yīng)用實(shí)例:
應(yīng)用實(shí)例:
表1 成功使用cellvation™ 進(jìn)行凍存的細(xì)胞名稱 | ||||
A375 人惡性黑色素瘤細(xì)胞 | A549 人肺癌細(xì)胞 | D283 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | Daoy人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | DU 145 人前列腺癌細(xì)胞 |
HeLa 人宮頸癌細(xì)胞 | Hep-2 人扁平上皮癌細(xì)胞 | LNCaP 人轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞 | LS 174T 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | MCF7人乳腺癌細(xì)胞 |
MCF 10人正常乳腺上皮 | MRC-5人胚肺細(xì)胞 | NCI-H69 人肺小細(xì)胞癌 | PC-3 人前列腺癌細(xì)胞 | 人原發(fā)性骨髓和外周血干細(xì)胞 |
人原代淋巴細(xì)胞 | Raji人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞 | 人SF包皮細(xì)胞細(xì)胞 | ST486 人urkitts淋巴瘤 | U-937 人組織細(xì)胞淋巴瘤 |
3T3 小鼠胚胎成纖維 | B16BL6 小鼠惡性黑素瘤細(xì)胞 | B16F10小鼠惡性黑素瘤細(xì)胞 | NSO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 | P31NSI/Ag4-1(NS-1) 小鼠非分泌型骨髓瘤細(xì)胞 |
Sp2/0-Ag14 小鼠非分泌型雜交瘤細(xì)胞 | Rat2 大鼠胸苷激酶突變體胚胎細(xì)胞 | CB 牛主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(原代) | MDBK 牛腎臟細(xì)胞 | CHO-K1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞 |
hilDCK 犬腎臟細(xì)胞 | CRFK 貓腎臟細(xì)胞 | LLC-PK 豬腎臟細(xì)胞 | ST 豬胎睪丸(原代) | 非洲綠猴 Vero腎臟細(xì)胞 |
ZF4 斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞 | JB6C1 小鼠30-7b 表皮腫瘤細(xì)胞 | JB6C1 小鼠 41-5a 表皮腫瘤細(xì)胞 | RT 101小鼠表皮腫瘤 | RAW 264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞 |
CPA-47 牛肺動脈細(xì)胞 | CPAE Bos Taurus(牛)肺動脈內(nèi)皮 | PU5-1.8(PU5-1R) 小鼠單核巨噬細(xì)胞 | IC-21小鼠巨噬細(xì)胞 | P388D 小鼠單核巨噬細(xì)胞 |
BL-3 B 白血病懸浮淋巴細(xì)胞 | BT 牛鼻甲細(xì)胞 | CCD-18Co 人正常結(jié)腸成纖維細(xì)胞 | EBTr牛胚胎器官細(xì)胞 | EJG 牛毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
HCT 116人結(jié)腸癌 | LB9.K 牛正常腎臟 | 6LBLN牛淋巴結(jié)細(xì)胞 | LS180 人腺癌細(xì)胞 | 293 人轉(zhuǎn)移性原代胚胎腎 |
表2 細(xì)胞凍存前后復(fù)蘇率比較 | |||
細(xì)胞系 | % (凍存前細(xì)胞活力) | % (使用 cellvation™凍存后細(xì)胞活力) | % (使用10% DMSO, 10% FBS, RPMI 1640凍存后細(xì)胞活力) |
SP 2/0 AG 14小鼠骨髓瘤細(xì)胞 | * | 95% | 90% |
A375 人惡性黑色素瘤細(xì)胞 | 95% | 85% | 80% |
U937 人組織淋巴瘤細(xì)胞 | 90% | 85% | 60% |
實(shí)驗(yàn)步驟:
√凍存(使用前混合均勻,不需稀釋)
(1)檢測細(xì)胞培養(yǎng)物:是否含污染物、是否健康生長、生長密度等
(2)若凍存貼壁細(xì)胞,37℃,0.25%胰酶消化細(xì)胞1-3min;
注:一些生長在無血清培養(yǎng)基的細(xì)胞系可能對0.25%胰酶敏感,此時需用更少的胰酶或添加胰酶抑制劑;
(3)細(xì)胞計(jì)數(shù),確定活細(xì)胞總量。細(xì)胞活力需高于80%且細(xì)胞需處于對數(shù)期后期或生長匯合前期;
(4)細(xì)胞懸液600-800rpms離心10min,去除上清。保留3-5ml用來做無菌檢測(如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、腦心浸液培養(yǎng)基等)和支原體檢測。
(5)適當(dāng)體積的cellvation™ 輕輕重懸細(xì)胞,使用濃度為1 x 106- 1 x 107 cells/ml.一些細(xì)胞種類如雜交瘤或骨髓瘤需要增加細(xì)胞密度。
(6)分裝細(xì)胞懸液于塑料或玻璃凍存管內(nèi),每管約1-2ml;
(7)密封管子,室溫儲存20-30min,期間偶爾輕輕搖動,使細(xì)胞*與凍存液接觸;
(8)將凍存管放在*緣容器內(nèi),于 -20℃凍存1 hour。將凍存管取出,轉(zhuǎn)到-70℃冰箱放置1 hour(至關(guān)重要的一步,放到-70℃的時間不要超過2 hours),之后將瓶子轉(zhuǎn)到放到液氮?dú)庀嗖糠郑瑑龃?/span>24 hours后再轉(zhuǎn)至液氮。對大多數(shù)細(xì)胞*的冷凍率1℃/min;
√ 細(xì)胞復(fù)蘇
(1)從液氮中取出細(xì)胞凍存瓶,37℃水浴快速解凍細(xì)胞;
(2)70%乙醇插拭瓶子表面;
(3)將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶內(nèi),輕輕加入合適體積的生長培養(yǎng)基(2-5 ml);
(4) 37℃細(xì)胞復(fù)蘇至少2h后開始計(jì)數(shù)(如臺盼藍(lán)染料排除法);
(5)細(xì)胞貼壁后再更換新培養(yǎng)基,對于懸浮細(xì)胞則24 hours后換液。
若有必要,按以下方式清洗去除cellvation™:
(1)轉(zhuǎn)移細(xì)胞到15ml離心管內(nèi),輕輕加入2-3ml*生長培養(yǎng)基(解凍后的培養(yǎng)基更脆弱);
(2)400 - 600 rpms離心約5-6min;
(3)輕輕倒出上清,適當(dāng)體積生長培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,然后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶內(nèi);
(4)復(fù)蘇至少2h后開始計(jì)數(shù);
!特別重要:終止細(xì)胞培養(yǎng)前,建議對細(xì)胞做一個全面的凍存/解凍循環(huán)實(shí)驗(yàn)從而確保無菌培養(yǎng)及細(xì)胞的活力正常。
產(chǎn)品信息: 4℃-8℃保存,有效期至少1年。
品牌 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 目錄價(jià) |
Mpbio | 2030046 | cellvation™ 凍存液 | 20 ml | 1540.00 |
Mpbio | 20300M2 | cellvation™ 凍存液 | 60 ml | 3850.00 |
其他相關(guān)產(chǎn)品:室溫保存,可替代sigma公司的D2650。
品牌 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | * |
Mpbio | 196055 | DMSO細(xì)胞凍存液(細(xì)胞培養(yǎng)級),純度 ≥99% | 100 ml | 480元 |