供貨周期 | 一周 | 規格 | 50T/48S |
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貨號 | BR6025 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。 |
磷脂酶D( Phospholipases D,PLD )試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:
磷脂酶 D(EC3.1.4.4)即磷脂酰dan堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動植物和細菌等多種生物體中,具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。
測定原理:
磷脂酶D 催化水解磷脂酰dan堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和dan堿,dan堿在dan堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫,過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將 4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉紅色物質,在 500nm 處有特征吸收峰。
磷脂酶D試劑盒 脂肪酸系列-常備現貨
組成:
產品名稱 | BR6025-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 55ml | 4℃避光 |
試劑二:液體 | 8ml | 4℃避光 |
試劑三:粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑四:液體 | 35ml | 4℃避光 |
標準品:液體 | 1ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存。臨用前加 3ml 無水乙醇充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
自備儀器和用品:
天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無水乙醇。
酶液提取
1. 組織:按照質量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 離心 30min,棄上清,取沉淀溶于 1ml 試劑一。
2. 細胞:按照細胞數量(104 個):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1ml提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后于 4℃,10000g離心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 離心 30min,棄上清,取沉淀溶于 1ml 試劑一。
3. 血清:直接測定。
測定操作
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
試劑一(μl) | 100 | ||
試劑二(μl) | 150 | 150 | 150 |
標準品(μl) | 100 | ||
樣品(μl) | 100 | ||
試劑三(μl) | 50 | 50 | 50 |
充分混勻,30℃反應 30min,沸水浴 10min,打開蓋子,自然冷卻 5min。 | |||
試劑四(μl) | 700 | 700 | 700 |
30℃反應 30min,于 1ml 玻璃比色皿,空白管調零,測定 500nm 處吸光值,分別記為 A 標準管和A 測定管。 |