流感病毒是一種包膜病毒，主要根據內部核蛋白（NP）的保守性抗原差異分為甲型（A）、乙型（B）和丙型（C）三種類型。其中，只有甲型和乙型流感病毒對人類具有臨床相關性。甲型流感病毒比乙型流感病毒更為常見，與大多數嚴重的流感流行密切相關。此外，甲型流感病毒還可根據外部血凝素蛋白（H1-H16）和神經氨酸酶蛋白（N1-N9）的抗原差異進一步細分為不同的毒株或亞型。

核蛋白（NP）的主要功能是包裹分段的RNA基因組，并與三種聚合酶亞基（PA、PB1和PB2）結合，形成核糖核蛋白復合體（RNPs），從而實現RNA的轉錄、復制和包裝。

Cell Biolabs的流感A型核蛋白ELISA試劑盒是一種用于檢測和定量流感A型核蛋白的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒。該試劑盒的抗體僅能識別流感A型的核蛋白，不會與流感B型或C型的核蛋白發生交叉反應。試劑盒的檢測靈敏度為625皮克/毫升流感A型核蛋白。每套試劑盒提供的試劑足以進行最多96次檢測，包括標準曲線和流感A型裂解樣本。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs銷售產品甲型流感核蛋白ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

甲型流感核蛋白ELISA試劑盒檢測原理：

將抗流感A型核蛋白單克隆抗體吸附在微量滴定板上。樣本或標準品中的流感A型核蛋白會與吸附在板上的抗體結合；隨后加入FITC標記的抗流感A型核蛋白單克隆抗體，與被第一抗體捕獲的流感A型核蛋白結合。經過孵育和洗滌步驟后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗FITC單克隆抗體，與FITC標記的抗流感A型核蛋白單克隆抗體結合。在洗滌步驟中去除未結合的HRP標記的抗FITC抗體，然后向孔中加入與HRP反應的底物溶液。根據樣本中流感A型核蛋白的含量，會形成相應比例的有色產物。通過加入終止液終止反應，并在450納米處測量吸光度。使用提供的重組流感A型核蛋白標準品制備標準曲線，從而確定樣本中流感A型核蛋白的濃度。

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試劑盒組成

盒子1（常溫運輸）

1. 抗流感A型核蛋白抗體包被板（部件號51741B）：一條96孔板。  

2. FITC標記抗流感A型核蛋白單克隆抗體（部件號51742C）：一瓶20微升。  

3. 辣根過氧化物酶標記抗FITC單克隆抗體（部件號310811）：一瓶20微升。  

4. 檢測稀釋液（部件號310804）：一瓶50毫升。  

5. 10倍病毒裂解緩沖液（部件號51693B）：一瓶15毫升，含有200 mM Tris，pH 7.5，1500 mM NaCl，10% Triton X-100，1% SDS。  

6. 10倍洗滌緩沖液（部件號310806）：一瓶100毫升。  

7. 底物溶液（部件號310807）：一瓶12毫升，琥珀色瓶。  

8. 終止液（部件號310808）：一瓶12毫升。  

盒子2（藍冰運輸）

1. 重組流感A型核蛋白標準品（部件號51743D）：一瓶100微升，4微克/毫升重組人流感B型核蛋白（Met1-Tyr560），含有BSA的PBS溶液。

未提供材料

1. 流感A型樣本：純化病毒或未純化的病毒上清液  

2. 微量離心機  

3. 10微升至1000微升可調節單通道微量移液器及一次性吸頭  

4. 50微升至300微升可調節多通道微量移液器及一次性吸頭  

5. 多通道微量移液器儲液槽  

6. 能在450納米處讀數的微孔板讀數儀（620納米為可選參考波長）  

保存方法

收到試劑盒后，將流感A型核蛋白標準品分裝并保存在-20℃，避免反復凍融。其他所有組分保存在4℃。

結果示例

以下圖表展示了典型的流感A型核蛋白ELISA檢測結果。以下數據僅供參考，不應用于解釋實際結果。

文獻參考：

1. Eisfeld AJ, Neumann G, Kawaoka Y. (2015) At the centre: influenza A virus ribonucleoproteins. Nat Rev Micro. 13, 28–41.

2. Compans RW, Content J, Duesberg PH. (1972) Structure of the Ribonucleoprotein of Influenza Virus. J Virol. 10, 795–800.

3. Martin K, Helenius A. (1991) Transport of incoming influenza virus nucleocapsids into the nucleus. J Virol. 65, 232–244.

4. O’Neill RE, Jaskunas R, Blobel G, Palese P, Moroianu J. (1995) Nuclear import of influenza virus RNA can be mediated by viral nucleoprotein and transport factors required for protein import. J Biol Chem. 270, 22701–22704.

5. Avalos RT, Yu Z, Nayak DP. (1997) Association of influenza virus NP and M1 proteins with cellular cytoskeletal elements in influenza virus-infected cells. J Virol. 71, 2947–2958.

6. Digard P, Elton D, Bishop K, Medcalf E, Weeds A, Pope B. (1999) Modulation of nuclear localization of the influenza virus nucleoprotein through interaction with actin filaments. J Virol. 73, 2222–2231.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學試劑品牌，作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商，為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的g端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。  

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