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高遷移率族蛋白b1試劑盒(定量)

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供貨周期 一個月 規格 96T
貨號 ST51011 應用領域 醫療衛生,生物產業,制藥/生物制藥,綜合
主要用途 可用于定量測定人血清和血漿中的HMGB1含量

高遷移率族蛋白b1試劑盒(科研)  HMGB1試劑盒(ELISA法)


通用名稱:人高遷移率族蛋白檢測試劑盒(ELISA法)
英文名稱:HMGB1 ELISA  
產品規格:96T
產品貨號:ST51011
產品品牌:德國IBL

試劑盒預期用途
高遷移率族蛋白b1試劑盒(定量)可用于定量測定人血清和血漿中的HMGB1含量。此外,該試劑盒可用于來自牛,豬,兔,小鼠和大鼠的血清,血漿和腦脊液(CSF)的研究。也可以檢測細胞培養基和BALF(支氣管肺泡液)。

前言簡介

HMGB1是大約30kDa的蛋白質,是非組蛋白核蛋白組的主要成分。HMGB1(高遷移族Box1蛋白)是轉錄調節因子,通常存在于哺乳動物細胞的細胞核和細胞質中。


HMGB1在惡性疾病等疾病的發病機理中起重要作用。在腫瘤的情況下,細胞的氧供應可以斷開。 這導致細胞死亡(壞死)和釋放HMGB1,進而導致在相鄰腫瘤環境中形成朝向腫瘤的血管生成。這些血管確保腫瘤的存活和進一步的生長。


體外研究表明,通過定量測定HMGB1濃度,可以區分病理性細胞死亡(壞死)和生理細胞死亡(細胞凋亡)。在壞死中觀察到更高的HMGB1值。HMGB1在膿毒性休克后期也起重要作用。 結果表明,即使在膿毒性休克后期,HMGB1在動物實驗中的抑制顯著提高了嚙齒動物的存活率。HMGB1通過與RAGE(“晚期糖基化終產物的受體”)結合起作用,具有與細胞因子TNF-α和IL-6相似的促炎作用。 膿毒癥患者血清中也可見高值。血液中的HMGB1濃度在許多其他疾病中也增加,包括類風濕性關節炎(RA)急性肺損傷(ALI)和彌散性血管內凝血(DIC)。HMGB1 ELISA由Ikuro Maruyama博士和Shino-Test Corporation(日本)開發。本產品由Shino-Test公司授權的IBL制造。


試劑盒檢測原理

高遷移率族蛋白b1試劑盒(定量)是用于定量測定血清和血漿中HMGB1的夾心酶免疫測定。 微量滴定板孔用純化的抗HMGB1抗體包被。樣品中的HMGB1特異性結合固相的抗體,并被第二個酶標記的抗體識別。底物反應后,HMGB1濃度由顏色強度決定。


試劑盒組成成分

數量標簽組成
1 x 12 x 8MTP微孔板可拆卸,包被有抗HMGB1多克隆抗體
1 xENZCONJ  LYO酶標記物  凍干粉含有與過氧化物酶結合的HMGB1,2 。
1 xCAL   LYO標準品 凍干粉含有豬HMGB1 ,稀釋見章節10.1
1 xCONTROL+   LYO陽性質控  凍干粉含有豬HMGB1 ,稀釋見章節10.1
1 x 20 mLDILBUF稀釋液即用型,含有:緩沖液,0.01 % NaN3.
1 x 12 mLENZCONJ DIL酶標記物稀釋液即用型,含有:緩沖液
2 x 100 mLWASHBUF   CONC洗滌液  5X濃縮含有:磷酸鹽緩沖液,<0.5 %Tween 20.
1 x 6 mLCOLREA   A底物液A即用型。
1 x 6 mLCOLREA   B底物液B即用型
1 x 12 mLCOLOUR  STOP終止液即用型,含有:0.35M硫酸
2 xFOIL蓋板膜


所需材料(未提供)
1. 微量移液器(Multipette Eppendorf或類似設備,CV<3%)。 體積:10; 20; 100; 100-1000μL
2. 渦街攪拌機
3. 軌道搖床(500 rpm)
4.  8通道微量移液器
5. 洗瓶,自動或半自動微量滴定板清洗系統
6. 能夠讀取450nm吸光度的酶標儀(參考波長600-650nm)
7. 雙蒸水或去離子水
8. 紙巾,吸頭和定時器
9. 聚苯乙烯(PS)或聚丙烯(PP)管用于標準和樣品稀釋
10. + 37°C和+ 25°C孵育箱

高遷移率族蛋白b1試劑盒(定量)

儲存條件
高遷移率族蛋白b1試劑盒(科研)在環境溫度下運輸,儲存應在2-8°C。 遠離熱源或陽光直射。 樣品和制備的試劑的儲存和穩定性在相應的章節中有描述。開封的微量滴定板條在試劑盒的有效期限內保持穩定,但應在密封的袋子中儲存在2-8°C。

HMGB1試劑盒檢測步驟

1分別加入100ul稀釋液到相應的板孔中。
2分別加入10ul稀釋液到板中的空白孔。
3分別加入10ul標準品,陽性質控及血清或血漿樣本到相應的孔中,短暫搖動30s。
4用蓋板膜蓋板,在+37℃溫育20-24h。
5移去蓋板膜,棄去溶液,用稀釋好的洗滌液400ul/孔洗滌板孔5次,用吸水紙拍干多余的液體。
6每孔加入100ul酶標記物。
7蓋板膜蓋板,+25℃溫育2 h。
8移去蓋板膜,棄去溶液,用稀釋好的洗滌液400ul/孔洗滌板孔5次,用吸水紙拍干多余的液體。
9為了添加顯色液和終止液,如果有的話,可以使用8通道微量移液器。移液應在底物液和終止液加液時的相同時間間隔內進行。使用正位移并避免形成氣泡
10每孔 加入100ul顯色液。
11室溫(18-25°C)孵育30min。
12每孔加入100ul終止液終止反應,將內容物輕輕混合搖勻。
13清理板孔背面。 小心不要劃傷板孔,因為這可能會干擾測量。
1460min內在450nm(參考波長600-650nm)處讀取吸光度值。


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