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BY-1708 NRm黑化大家鼠肺成纖維細胞系

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NRm黑化大家鼠肺成纖維細胞系
NRm黑化大家鼠肺成纖維細胞系在黑化大家鼠肺部生物學研究中有著關鍵地位,為科研人員深入探究其肺成纖維細胞的特性與功能提供了穩定的體外研究載體,有助于系統解析肺部的發育機制、纖維化過程及相關病理變化,對該物種的保護及相關研究工作意義重大。
黑化大家鼠多棲息于城市、鄉村等多種環境,其肺部系統為適應復雜多變的生存條件,如空氣污染物、病原體等,進化出了一定的適應能力。肺成纖維細胞作為肺部結締組織的主要細胞成分,在維持肺組織結構、參與損傷修復及纖維化過程中發揮著重要作用。以往對黑化大家鼠肺部的研究多集中在整體層面,難以在細胞水平深入解析肺成纖維細胞的功能機制,而原代肺成纖維細胞培養存在存活時間短、傳代后功能不穩定等問題,極大限制了研究的深度與廣度。NRm 細胞系的建立,恰好填bu了這一研究空白。
NRm 黑化大家鼠肺成纖維細胞系來源于健康成年黑化大家鼠的肺組織,通過原代培養與特異性純化技術構建而成。初代培養時,將獲取的肺組織處理至合適大小,用含雙抗的 PBS 緩沖液反復沖洗以去除雜質,經處理使細胞分離后,以適宜密度接種到含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養液中,置于 37℃、5% CO?培養箱中培養。初期每天更換培養液以淘汰非貼壁細胞,當細胞匯合度達到 80% 時,采用合適方式使細胞脫離瓶壁進行傳代。目前該細胞系已穩定傳代 35 代以上,經檢測細胞活力始終保持在 87% 以上。
該細胞系呈現典型的成纖維樣形態特征:細胞呈長梭形,胞體修長,平均長度約 55μm,寬度約 7μm,排列方式多為平行或漩渦狀;胞質豐富,含有大量的粗面內質網和高爾基體,經特定染色后可觀察到較多的膠原纖維前體;細胞核呈長橢圓形,位于細胞中央,核質比約為 1:4.5,具有穩定的貼壁生長特性。生長動力學研究顯示,NRm 細胞在 DMEM 培養液中生長狀態最佳,最適宜的培養溫度為 37℃,在 10% 胎牛血清濃度下,群體倍增時間約為 72 小時。連續傳代 30 代后,細胞形態未出現明顯變異,核型分析顯示染色體數目穩定,與黑化大家鼠體細胞一致,遺傳背景穩定。
功能特性研究表明,NRm 細胞高表達肺成纖維細胞特異性標志物:波形蛋白(Vimentin)陽性率為 98%,Ⅰ 型膠原蛋白(ColⅠ)分泌量達 35μg/10?cells/24h,成纖維細胞特異性蛋白 1(FSP-1)表達強度顯著高于上皮細胞系。該細胞具備活躍的基質合成功能,能大量分泌膠原纖維、纖維連接蛋白等細胞外基質成分,在體外培養中可促進肺組織樣結構的形成。環境適應實驗顯示,當受到炎癥因子刺激時,細胞內轉化生長因子 -β1(TGF-β1)的表達量會在短時間內上調,促進細胞增殖和膠原合成;模擬氧化應激后,抗氧化相關基因的表達量升高,提示其具有一定的應激適應能力。
在應用價值方面,NRm 細胞系已成為多個研究領域的重要工具:在肺纖維化研究中,通過相關技術沉默 ColⅠ 基因后,細胞的膠原合成能力明顯下降,證實了該蛋白在肺纖維化過程中的核心作用;比較生理學研究發現,與普通大家鼠的肺成纖維細胞相比,NRm 細胞的抗污染相關基因基礎表達量更高,揭示了其適應復雜環境的分子基礎;在藥理學領域,該細胞系可用于篩選抗肺纖維化藥物,研究發現特定藥物在一定濃度下能有效抑制細胞的過度增殖和膠原合成,且毒性較低。
作為永生化的黑化大家鼠肺成纖維細胞系,NRm 不僅為黑化大家鼠肺部生物學研究提供了標準化模型,其du特的環境適應機制研究還能為嚙齒類動物比較生理學提供新視角,在野生動物保護、肺部疾病模型構建等領域具有重要的科研與應用價值。

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