脂質本2000 1.5ml GIBCO11668-019原裝

本公司所有產品均為科研試驗用，不能用于臨床！

脂質本2000      GIBCO11668-019     1.5ml

【性能參數】

產品名稱： 脂質體2000

英文名稱： Lipofectamine 2000 Reagent

產品貨號： 11668-027/11668-019

產品規格： 0.75mL/1.5mL

產品產地： 美國

產品商標： invitrogen 

保存與運輸： 4℃

現貨狀態： 現貨

詳細資料： 實驗方法技術資料 

北京方程生物 

脂質本2000 1.5ml GIBCO11668-019原裝

Lipofectamine 2000轉染試劑是一種多用途轉染試劑，可在各種貼壁和懸浮細胞系中提供高效轉染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進行基于siRNA和shRNA的基因敲除實驗及基因表達研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質粒DNA共轉染的*試劑。


采用Lipofectamine 2000試劑，您可以實現：

在各種細胞系中具有的轉染效率和高重組蛋白表達水平 (表1)

出眾的siRNA和質粒DNA共轉染性能

在血清存在時亦具有可靠的轉染效率 – 轉染后無需更換培養基

適用于高通量應用的可靠性能

建立穩定細胞系的*選擇


適用于基因表達和基因沉默的高性能轉染試劑

Lipofectamine 2000試劑適合所有常見細胞系及許多難以轉染的細胞系，可用于含有或不含

血清的培養基。在基因沉默應用中，Lipofectamine 2000試劑的高效轉染提供了很高的基因敲除水平，

足以獲得令人信服的結果。Lipofectamine 2000試劑可實現siRNA和質粒DNA的高效轉染，它是共轉染的

*試劑。Lipofectamine 2000試劑使用方便 – 只需將其與核酸混合，加入細胞培養物即可。


適合高通量操作

Lipofectamine 2000試劑使用簡單、快速且具有很高的轉染效率，適用于瞬時蛋白表達或

高通量RNAi轉染。在上述應用中，可輕松建立自動化或機器人系統轉染條件。如需了解有關

Lipofectamine 2000的實驗方案、文獻引證及其它產品信息，可登錄細胞系數據庫。


僅供研究使用。不得用于人或動物的治療或診斷。

Lipofectamine 2000轉染試劑是一種多用途轉染試劑，可在各種貼壁和懸浮細胞系中提供高效轉染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進行基于siRNA和shRNA的基因敲除實驗及基因表達研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質粒DNA共轉染的*試劑。


脂質體2000 描述

脂質體2000是專門用于將核酸轉染進入真核細胞的一種形式我們提供下列的建議

在多種細胞和培養板中都有很高的轉染效率。在網上列出的細胞類型中都獲得了較高的轉染效率。 核酸-脂質體2000的復合物可以直接加入到細胞培養液中無論是有血清還是無血清的情況。 轉染之后不用移除復合物或者更換培養液但是復合物應在轉染后4-6h移除。 轉染的一些重要指導 DNA轉染使用page3 我們建議使用Opti-MEM I reduced serum  培養基來稀釋脂質體2000和核酸。 轉染時不要向培養基中加入抗生素。 在實驗過程中要保持一樣的條件  

DNA轉染 使用下列方法

在24孔板內轉染DNA進入哺乳動物細胞。對于其他的板子可以參考page4.所有的數量和體積都是基于一個孔的劑量。準備復合物使DNAug脂質體ul的比例為1:2到1:3。轉染時細胞密度較高可以獲得高的效率高的表達水平以及使毒性降低。條件的選擇很重要。

1. 貼壁細胞在轉染前一天向24孔板內接種0.5-2*105個細胞使得細胞在轉染時融合率達到90-95%。切記使用不含抗生素的培養基。

2. 對于每一個轉染樣品按照如下方法準備復合物 A 使用無血清的培養基將DNA稀釋為50ul溫和混勻。 B 使用前混勻脂質體2000然后用培養基將一定量的脂質體2000稀釋為50ul。室溫孵育5min。 進行到c時間不超過25min     C5min的孵育后混合稀釋的DNA和稀釋的脂質體2000總體積為100ul。溫和混勻室溫孵育20min溶液呈現云霧狀.混合物在室溫可穩定存在6h。

3. 向含有細胞和培養液的板子中每孔加入100ul的復合物通過敲打板子和來回晃動使其混合均勻。

4. 細胞孵育18-48h后可檢測轉染情況。培養液可在轉染4-6h后更換。

5. 對穩定的細胞系傳代細胞在轉染后以1:10的比例加入新鮮的培養液。第二天加入選擇培養基。  優化轉染 為了獲得高的轉染效率和低毒性通過調整細胞濃度和DNA:脂質體2000的比例來優化轉染條件。確保細胞90%的融合以及DNA(ug)脂質體ul比例在1:0.5到1:5。   轉染條件的浮動   轉染到不同類型的培養板中脂質體2000的核酸的量細胞數以及合適的培養基量都在下表中顯示。在96孔板中建議總體積到50ul

Gibco 16140-07

Gibco 12664-025胎牛血清，間充質干細胞，澳洲源Fetal Bovine Serum, Mesenchymal Cell Qualified, Australia Origin 500MLGibco12676-011胎牛血清，熱滅活活性炭處理，美國源Fetal Bovine Serum, charcoal stripped, USDA-approved regions 100ML

脂質本2000      GIBCO11668-019     1.5ml