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C1031 檸檬酸鈉抗原修復液(1×) 100/500ml
C1032 檸檬酸鈉抗原修復液(50×) 100/500ml
產品簡介:福爾馬林固定時,組織中的許多氨基酸殘基在分子內或分子間形成了醛鍵,使得不少抗原決定簇被封閉。同時,由于甲醛的聚合作用,使蛋白質分子間相互交聯形成大分子網絡,也導致了抗原決定簇被掩蓋,這就使得相當部分的抗原不能與抗體很好地進行反應。抗原修復能很大程度地恢復在切片制作等過程中被遮蔽的抗原,從而大大提高IHC染色的陽性率。石蠟包埋組織一般都是用福爾馬林固定,因此抗原修復已成為福爾馬林固定石蠟包埋切片IHC實驗必要的常規步驟。
0.01M檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0)即枸櫞酸鈉緩沖溶液是免疫組化中常用的抗原修復液。
使用方法:
1. 對于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯3次,每次3-5min→ 無水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸餾水洗2次,每次3-5min。
b. 抗原修復:將切片浸泡在抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約15min (加熱時間可以控制在10-20 min內,佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸鈉抗原修復液(1×)使用前需預熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在20-30 min內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片5 min。將切片浸泡在檸檬酸鈉抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約15 min (加熱時間可以控制在10-20 min內,佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸鈉抗原修復液(1×)使用前需預熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在20-30 min內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
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