BiFC 蛋白相互作用檢測技術(shù)服務詳情介紹

BiFC 蛋白相互作用（Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC）是一種基于熒光蛋白復性的技術(shù)，用于研究蛋白-蛋白相互作用。該技術(shù)利用熒光蛋白（如黃色熒光蛋白 YFP、綠色熒光蛋白 GFP 或紅色熒光蛋白 mCherry）的片段化特性，將其分裂為兩個非熒光片段，分別與待研究的兩個蛋白融合表達。當這兩個蛋白在細胞內(nèi)相互作用時，熒光蛋白片段靠近并復性，形成完整的熒光蛋白，恢復熒光信號，從而實現(xiàn)對蛋白互作的可視化檢測。BiFC 蛋白相互作用分析在活細胞環(huán)境下進行，不依賴外源性化學物質(zhì)，因此成為研究細胞信號傳導、蛋白復合物形成及動態(tài)互作的工具，在癌癥生物學、神經(jīng)科學、植物生物學等領域均有廣泛應用。BiFC 蛋白相互作用的主要優(yōu)勢在于其高靈敏度和直觀可視化能力。相比傳統(tǒng)的蛋白互作檢測方法，如酵母雙雜交（Y2H）、免疫共沉淀（Co-IP）和熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET），BiFC 無需外加熒光探針或激發(fā)/受體分子，直接通過熒光復性檢測蛋白互作，從而降低了背景噪聲，提高了檢測靈敏度。此外，由于熒光復性后信號較穩(wěn)定，BiFC 還可以用于檢測短暫或低親和力的蛋白相互作用，這在研究信號轉(zhuǎn)導、應激反應及其他動態(tài)生物過程時具有價值。例如，在細胞周期調(diào)控研究中，BiFC 可用于揭示 CDK-Cyclin 復合物的形成；在神經(jīng)科學研究中，BiFC 被用于檢測突觸蛋白間的相互作用，從而解析神經(jīng)信號傳遞的關(guān)鍵機制。

BiFC 蛋白相互作用分析還具備出色的空間分辨率，可在亞細胞水平解析蛋白相互作用的定位。例如，通過靶向不同細胞器（如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細胞核等）的 BiFC 蛋白標記，可以研究特定細胞結(jié)構(gòu)中的蛋白互作。此外，BiFC 還可與共聚焦顯微鏡、活細胞成像技術(shù)結(jié)合，實現(xiàn)對蛋白互作的動態(tài)監(jiān)測，揭示蛋白復合物的時空變化。例如，在自噬研究中，BiFC 可用于實時觀察自噬體形成過程中關(guān)鍵蛋白 ATG 之間的相互作用，為解析自噬機制提供有力證據(jù)。

盡管 BiFC 蛋白相互作用技術(shù)具有諸多優(yōu)點，但其也存在一定局限性。例如，熒光蛋白復性通常是不可逆的，這意味著 BiFC 不能用于實時監(jiān)測蛋白解離過程。此外，熒光蛋白片段復性可能影響目標蛋白的功能或穩(wěn)定性，導致假陽性或假陰性結(jié)果。因此，在實驗設計時，研究人員通常會使用點突變或陰性對照實驗，以驗證 BiFC 信號的特異性。此外，不同熒光蛋白的 BiFC 片段在復性效率、穩(wěn)定性和熒光強度上可能存在差異，需根據(jù)實驗需求選擇合適的熒光蛋白系統(tǒng)。

近年來，BiFC 蛋白相互作用技術(shù)不斷優(yōu)化，以提高其實驗精度和適用性。例如，雙顏色 BiFC（Dual-color BiFC, dcBiFC）和三顏色 BiFC（TriFC）技術(shù)允許研究人員同時檢測多對蛋白互作，為復雜的蛋白互作網(wǎng)絡解析提供了更豐富的信息。此外，結(jié)合 CRISPR-Cas9 基因編輯技術(shù)，BiFC 使得內(nèi)源性蛋白的互作研究成為可能，提高了實驗的生理相關(guān)性。這些技術(shù)進步推動了 BiFC 在蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡、疾病機制研究及新藥篩選等領域的應用。

百泰派克生物科技依托zhuānyè的蛋白質(zhì)組學研究平臺，為客戶提供高質(zhì)量的蛋白相互作用檢測服務。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質(zhì)序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測序法的蛋白質(zhì)從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學、靶向蛋白質(zhì)組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質(zhì)組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

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