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Annexin染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒說明書

來源:上海美旋生物科技有限公司    2015年05月17日 11:31  


產(chǎn)品簡介:

細(xì)胞凋亡普遍存在于生物界,是細(xì)胞的基本特征之一,對胚胎發(fā)育及形態(tài)發(fā)生、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、機(jī)體的防御和免疫反應(yīng)等方面都起到十分重要的作用。

Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸(PS)的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。Annexin V是一種分子量為35.8kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,廣泛分布于真核細(xì)胞胞漿內(nèi),參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。AnnexinV能與磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡稱PS) 高親和力、特異地結(jié)合。在正常細(xì)胞中,PS主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,細(xì)胞膜上的PS會外翻到細(xì)胞表面。用帶有綠色熒光的Annexin V-FITC標(biāo)識出凋亡細(xì)胞。

本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI),PI可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。

綜上所述,參考下圖,用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活細(xì)胞不被Annexin V-FITC和PI染色(如箭頭指示);凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈陰性(如箭頭指示);壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時被Annexin V-FITC和PI雙重染色(如箭頭指示),以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞。

保存條件:

4℃保存,Annexin V-FITC、PI 染色液需避光保存,半年有效。若長期保存,可以把PI 染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存,Annexin V-FITC 結(jié)合液可以直接-20℃保存。

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