詳細介紹
商品介紹:
ML-323是一種有效的可逆的USP1-UAF1抑制劑,在Ub-Rho實驗中,IC50為76nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1572414-83-5 純度:99.61% 分子量:384.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ML-323 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蠕蟲狀節叢孢嗅覺神經相關蛋白STOML3抗體Anti-GCA Antibody腺苷環化關聯蛋白1(CAP1)
淚珠狀坂口氏酵母絲羧肽1抗體Anti-GC Antibody腺苷環化9(ADCY9)
黑曲霉神經突觸前膜胞內蛋白18抗體Anti-GCG Antibody腺苷環化8(ADCY8)
唐菖蒲青霉白介1受體相關蛋白抗體Anti-GBP1 Antibody腺苷環化7(ADCY7)
鏈霉菌(青色類群)磷化蛋白酪磷2抗體Anti-GCK Antibody腺苷環化6(ADCY6)
擬枝孢鐮孢SYF2蛋白抗體Anti-GCLC Antibody腺苷環化5(ADCY5)
馬爾科夫葉點霉膽固酰基轉移2抗體Anti-GDF8/Myostatin/MSTN Antibody腺苷環化4(ADCY4)
拜氏不動桿菌Saitohin蛋白抗體Anti-GDA Antibody腺苷環化3(ADCY3)
大腸桿菌突觸結合蛋白1抗體Anti-GDF15 Antibody腺苷環化2(ADCY2)
米氏假單胞菌磷化突觸結合蛋白1抗體Anti-GCLC Antibody(PB0197)腺苷環化10(ADCY10)
根瘤菌突觸結合蛋白5抗體Anti-GDNF Antibody腺苷環化1(ADCY1)
癩擬層孔菌磷化D酪激衰減蛋白1抗體Anti-GDNF Antibody腺苷裂解(ADSL)
巨大芽胞桿菌可溶性附著蛋白α-SNAP抗體Anti-GFAP Antibody腺苷甲硫脫羧1(AMD1)
球孢白僵菌信號轉導和轉錄激活因子4抗體Anti-GFAP Antibody(PB0046)腺苷激(ADK)
楷米干酪菌線粒體鐵轉運蛋白2抗體Anti-GFI1 Antibody腺苷合(ADSS)
腸膜明串珠菌腫瘤抑制蛋白18抗體Anti-GFI1 Antibody腺苷高半胱水解(AHCY)
絲蛋白抑制劑B4抗體鱗狀細胞抗原靈芝(赤芝,紅靈芝)人肺大靜脈內皮細胞
抑蛋白5抗體乳明串珠菌人支氣管上皮細胞
泛結合蛋白P62抗體乳類芽孢桿菌人支氣管成纖維細胞
芳基磺基轉移1抗體赭色擲孢酵母人肺成纖維細胞
USP1-UAF1抑制劑(ML-323)馬昆德擬青霉 2-氟-5-(三氟甲基)補體1qElisa
大腸埃希氏 三氟磺酸銩華支睪吸蟲IgG抗體Elisa
灰黃鏈霉 4-氟-2-三氟甲酸囊尾蚴IgMElisa
灰樹花 苯并-15-冠-5α半乳糖基抗原Elisa
蘑菇 乙酰肼胸腺肽β4Elisa
氨桿 2-基嘧啶甲型H3流感Elisa
光硬皮馬勃 1-甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷二(四氟酸)鹽甲型H1N1流感Elisa
盤長孢狀盤孢 4-(叔辛基)硫氧還蛋白相互作用蛋白Elisa
釀酒酵母 4-羧基苯酸硫氧還蛋白Elisa
臭椿尾孢 乙酰酮鐵(III)髓觸發受體2Elisa
Halomonas 二苯硫O型口蹄疫抗體Elisa
球孢白僵 4,4-二氨基二苯硫外信號調節激Elisa
拉浩爾谷農球 雙(三苯基膦)二化鈀(II)Ⅵ型膠原Elisa
棲熱屬 4-氨基二苯CD163分子Elisa
假根蘑菇 雙(三苯基膦)合化羰基銠(I)肝Elisa