詳細介紹
商品介紹:
Aprotinin是分離自牛肺的絲氨酸蛋白酶抑制劑,對胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的Ki值分別為0.06pM和9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:9087-70-1 純度:99.56% 分子量:6511.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Aprotinin | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
opiorphin(opiorphin)ELISA Kit英文名稱:opiorphin ELISA KitBTBD6蛋白抗體包裝5g
N-乙?;?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)ELISA Kit英文名稱:AcSDKP ELISA KitBMP內皮調節蛋白抗體包裝25g
N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)ELISA Kit英文名稱:NAG ELISA Kit肝病NS5A反轉錄蛋白8抗體包裝5g
N端前腦鈉(NT-proBNP)ELISA Kit英文名稱:NT-proBNP ELISA Kit骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切抗體包裝1g
NANOG同源域蛋白(NANOG)ELISA Kit英文名稱:NANOG ELISA Kit骨形態發生蛋白9抗體包裝5g
NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)ELISA Kit英文名稱:SIRT1 ELISA Kit微管蛋白β輔助因子D抗體包裝25g
NADPH氧化1(NOX1)ELISA Kit英文名稱:NOX1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體包裝5g
M型肌激(CKM)ELISA Kit英文名稱:CKM ELISA Kit有絲分裂蛋白BUB3抗體包裝1g
MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)ELISA Kit英文名稱:MAPKAPK2 ELISA Kitp60TRP蛋白抗體包裝5g
L選擇(L-Selectin/CD62L)ELISA Kit英文名稱:L-Selectin/CD62L ELISA Kit博萊霉解抗體包裝1g
L-乳脫氫A鏈(LDH-A)ELISA Kit英文名稱:LDH-A ELISA Kit短蛋白聚糖抗體包裝5g
L解(PAL)ELISA Kit英文名稱:PAL ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白3抗體包裝10MG
Klotho(Klotho)ELISA Kit英文名稱:Klotho ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體包裝100g
KI-67抗原(MKI67)ELISA Kit英文名稱:MKI67 ELISA Kit堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體包裝25g
I型膠原蛋白(COL-1)ELISA Kit英文名稱:COL-1 ELISA Kit骨形態發生蛋白受體1B抗體包裝5g
ASH1蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)CWHM-12是αV整聯蛋白的有效抑制劑,抑制αvβ8,αvβ3,αvβ6和αvβ1的 IC50 值分別為0.2,0.8,1.5,1.8 nM。
絲氨酸蛋白酶抑制劑(Aprotinin)絲/蘇蛋白質激抗體磷烯式羧激1(PCK1)檢測試劑盒PCK1 ELISA Kit
α-連環蛋白抗體(鈣粘蛋白相關蛋白)Catenin α磷張力蛋白同源物(PTEN)檢測試劑盒PTEN ELISA Kit
癌易感因2相互作用蛋白抗體磷肌依賴性蛋白激1(PDPK1)檢測試劑盒PDPK1 ELISA Kit
質連接蛋白1抗體磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)檢測試劑盒PI3K2α ELISA Kit
盤狀結構域受體蛋白2抗體磷二酯12(PDE12)檢測試劑盒PDE12 ELISA Kit
膜糖蛋白CD200抗體淋巴細胞趨化因子(Lptn)檢測試劑盒Lptn ELISA Kit
胰羧肽A1抗體淋巴細胞抗原75(LY75)檢測試劑盒LY75 ELISA Kit
羧肽A2抗體淋巴細胞功能關聯抗原2(LFA2)檢測試劑盒LFA2 ELISA Kit
腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體淋巴毒β(LTβ)檢測試劑盒LTβ ELISA Kit