詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:CK1抑制劑(D4476)
英文名稱:D4476
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
D4476是具有有效性,選擇性和細胞滲透性的CK1抑制劑,其在體外實驗的IC50值為0.3μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:301836-43-1 別名:Casein Kinase I Inhibitor 純度:99.64% 分子量:398.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
瓜亡革菌泛激1抗體Anti-CCNT1 AntibodyCD68分子(CD68)
枯草芽孢桿菌泛激2抗體Anti-CCNE1 AntibodyCD63分子(CD63)
韓國海桿狀菌泛激3抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子樣蛋白(CD5L)
微紫青霉p53調控PA26核蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子(CD5)
香栓孔菌26S蛋白調節亞型S5a抗體Anti-CCR10 AntibodyCD4分子(CD4)
枯草芽胞桿菌枯草亞種絲/蘇蛋白磷3B抗體Anti-CCR2 AntibodyCD45分子(CD45)
靈芝蛋白香葉烯基轉移1α抗體Anti-CCR10 AntibodyCD44分子(CD44)
牛肝菌(可訂購)泛連接抗體Anti-CCR2 AntibodyCD44變體6(CD44-v6)
銹色房屋芽胞桿菌PGBD3蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD40配體(CD40L)
赭曲霉泛激4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD3分子(CD3)
壞死梭桿菌壞死亞種膜鈣ATP1抗體Anti-CCR2 AntibodyCD34分子(CD34)
Taonella膜鈣ATP4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD30分子(CD30)
嗜放線線束菌*膜鈣ATP4B抗體Anti-CCR3 AntibodyCD22分子(CD22)
大腸埃希氏桿菌膜鈣轉運ATP抗體Anti-CCR3 AntibodyCD209分子(CD209)
Paenibacillus溶質載體蛋白家族21成員2抗體Anti-CCR4 AntibodyCD19分子(CD19)
白色念珠菌脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50)Anti-CCR4 AntibodyCD15分子(CD15)
芽胞桿菌Bacillus│cereus 質量規格:98%,BR,一物
鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質量規格:>98%,BR
: AS3.3416資源名稱: 外來毛霉 質量規格:>98%,BR
CK1抑制劑(D4476)黃須腹 沙氏葡萄糖瓊脂膠原蛋白IElisa
鏈霉 (燼灰類群) 沙氏葡萄糖霉瓊脂膠原蛋白IIElisa
孟氏假單胞 運動發酵單胞T培養基肌球蛋白Elisa
淡紫擬青霉 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基抗肌蛋白Elisa
大腸埃希氏 WPM培養基谷氨酸脫羧Elisa
黑曲霉 MT培養基乙酰酯Elisa
日本曲霉 NA培養基-過氧化物Elisa
解幾丁質纖維單胞 可溶性淀粉培養基過氧化氫Elisa
海岸擬諾卡氏 霍亂紅胨水超氧化物歧化Elisa
銹色淺野氏 AK瓊脂(2號)羥自由基Elisa
大腸埃希氏桿 牛肝顆粒超氧陰離子Elisa
運動節桿 大腸群培養基(日本)抗氧化Elisa
焦曲霉 stuart運送培養基(含活性炭)過氧化物Elisa
球孢白僵 DPD培養基鈣調神經磷酸Elisa
巴基斯坦賴氨酸芽孢桿 念珠顯色培養基總抗氧化能力Elisa